DB12T 946-2020饲料中氨基酸的测定 离子交换色谱法.pdf

ICS 65.120 B 25 DB12 天 津 市 地 方 标 准 DB12/T 946—2020 饲料中氨基酸的测定 离子交换色谱法 Determination of amino acids in feeds-Ion exchange chromatography 2020 - 06 - 29 发布 天津市市场监督管理委员会 发 布 DB12/T 946—2020 前 言 本标准依据GB/T 1.1 2009给出的规则起草。 I DB12/T 946—2020 饲料中氨基酸的测定 离子交换色谱法 1 范围 本标准规定了饲料中氨基酸的离子交换色谱法测定方法的原理、试剂和材料、仪器设备、样品的采 集与制备、测定步骤和结果计算。 本标准适用于饲料原料、配合饲料及浓缩饲料中氨基酸含量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 603 化学试剂 试验方法中所用制剂及制品的制备 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1 饲料 采样 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 3 原理 3.1 常规酸水解法 饲料中的蛋白质在盐酸的作用下，水解成单一氨基酸，经离子交换色谱法分离并以茚三酮柱后衍生 测定。水解中，色氨酸全部被破坏，不能测量，胱氨酸和蛋氨酸部分氧化，不能测准。 3.2 氧化酸解法 将饲料蛋白中的含硫氨基酸（胱氨酸和蛋氨酸）用过甲酸氧化，使之转变为对酸稳定的氧化物，再 通过酸水解法释放出来，经离子交换色谱法分离并以茚三酮柱后衍生测定。 3.3 碱水解法 饲料中的蛋白质在碱的作用下，水解出色氨酸，经离子交换色谱法分离并以茚三酮柱后衍生测定。 4 试剂和材料 4.1 本标准所用试剂和水，在没有注明其它要求时，均指分析纯试剂和GB/T 6682 中规定的一级水； 所述溶液如未指明溶剂均系水溶液。试验中所需溶液、制剂及制品，在没有注明其它要求时均按GB/T 603 的规定制备。 4.2 盐酸：优级纯。 4.3 盐酸溶液（6 mol/L）：量取盐酸500 mL，用水稀释至1000 mL，混匀。 4.4 茚三酮溶液：按仪器说明书配制或购买。 4.5 pH 系列缓冲液、再生液：按仪器说明书配制或购买。 1 DB12/T 946—2020 4.6 甲酸：浓度为88%。 4.7 过甲酸溶液：将30%过氧化氢与甲酸按体积比1:9 混合，室温放置1 h，置冰水浴中冷却30 min, 临用前配制。 4.8 盐酸溶液（7.2 mol/L）：取盐酸600 mL，用水稀释至1000 mL，混匀。 4.9 氢氧化锂溶液（4 mol/L）：称取一水合氢氧化锂167.8 g，用水溶解并稀释至1000 mL，混匀。 4.10 柠檬酸钠缓冲液：称取柠檬酸三钠14.71 g、氯化钠2.92 g 和柠檬酸10.50 g，溶于500 mL 水 中，加入硫二甘醇5 mL 和辛酸0.1 mL