狂犬病的诊断与防控.pptVIP

狂犬病的诊断与防控 简述 狂犬病的病原体主要是狂犬病病毒，它会导致动物的急性脑炎和周围神经炎症，当神经症状出现后几乎必然死亡，通常的死亡原因都是由于中枢神经(脑-脊髓)被病毒破坏，最终死于神经受损导致的脏器衰竭。 狂犬病是由狂犬病毒引发的急性、进行性、几乎不可逆转的脑脊髓炎，是人畜共患的急性传染病。因其有恐水特征，故又名恐水症，它是目前病死率最高的疾病。 1881年法国巴斯德认为本病的病原体是极小的生物，1903年Negri在狂犬病人尸脑部发现了包涵体，并命名为Negri小体，直至现在仍然是诊断狂犬病的标准之一。 犬狂犬病的诊断 根据病犬的临床症状，结合被咬伤病史及其他可疑情况可以初步诊断。但要注意与破伤风等病鉴别诊断，确诊需做实验室检查。 常用的实验室诊断方法有内基氏小体检查，酶联免疫吸附试验，血凝抑制试验，补体结合试验，中和试验等等。 根据临床症状进行诊断 典型的狂犬形象为“伸舌红眼夹尾走，耸毛流涎不认人”。狂犬发病的病程一般可分三期：前驱期的行为改变，通常只有与狗接触较多的人才易发觉。如平时与你很亲近的狗变得退缩，或找地方躲藏，有时甚至会跑到很远的地方去。而平时不愿靠拢人的狗却变得与人十分亲热，舔主人的手和身体，这时狗的唾液中已含有病毒，因此有接触传染的危险。病狗此时中度发热，少食或不食，还可能会乱咬泥土、石块、破布等杂物，有时还会呆立凝视，或望空扑咬，遇到刺激则惊恐万状。前驱期持续 2天左右就进人兴奋期 ，此时病狗表现极不安静，并常攻击人或其他动物，流涎，尾巴紧紧夹在两后腿间，低头狂奔，两眼发红，甚至狂咬乱叫，颈项发硬或转动不灵等。此期狂暴发作往往与抑郁交替出现。病犬卧地不起，但不久又站起，表现一种特殊的斜视和惶恐的表情，当再次受到外界刺激时，再次发作。最后是麻痹期，表现为行动摇摆，被毛散乱，下颌下垂，张口伸舌，最终可因呼吸中枢衰竭或心力衰竭而死。 实验室诊断 内基小体检查 取新鲜未固定脑等神经组织制成压印标本或制作病理组织切片，用Seller氏染色，内基小体呈鲜红色，其中见有嗜碱性小颗粒。内基小体最易在海马回，大脑皮层椎体细胞和小脑蒲肯野细胞胞浆内检出，也见于丘脑，桥脑，脊髓，感觉神经节。 动物接种试验 取脑组织制成乳剂，给3-5周龄鼠脑内接种，在接种后第二天开始每天扑杀，用鼠脑做荧光抗体试验。如接种1-2周内出现麻痹，脑炎临诊症状，死后脑内检出内基小体，也可做出诊断 实验室诊断 免疫荧光抗体法检测抗原：发病第一周内取唾液、鼻咽洗液、角膜印片、皮肤切片，用荧光抗体染色，狂犬病病毒抗原阳性。 酶免疫吸附法（ELISA）： 酶免疫吸附法是上世纪七十年代建立的方法，目前世界上用于检测狂犬病毒抗体的酶免疫法基本上是采用间接ELISA法，其吸附抗原有全病毒颗粒、纯化的狂犬病毒糖蛋白以及纯化的狂犬病毒核衣壳蛋白（RNP），并以过氧化物酶标记的抗抗体作为标记抗体，即可检测人及不同动物血清中的抗狂犬病毒抗体。 防制 由于该病一出现临床症状即无治疗意义，死亡率高达100％，因此疫苗预防和控制是对待此病的基本措施。当发现患病动物或可疑动物不宜治疗，应尽快扑杀，防止其攻击人及其他动物，以免造成该病的传播。其次就是对犬和猫进行疫苗预防接种，当前大部分国家所用的兽用狂犬病疫苗主要有三种，即弱毒苗、灭活疫苗和基因工程疫苗。当前我国兽用的有灭活苗和弱毒苗两种，但是随着生物和分子生物学技术的发展，新型狂犬病疫苗已经逐渐走进研究者的视野。例如多肽疫苗、基因工程疫苗、核酸疫苗、活载体疫苗及植物疫苗等。 狂犬疫苗的发展——经历五代疫苗 神经组织疫苗 禽胚培养疫苗 细胞培养疫苗 亚单位及精致疫苗 基因工程疫苗 神经组织疫苗 最早制造狂犬病疫苗的是法国的巴斯德。1882年他成功地应用连续传代减弱病毒毒力的方法，用适应毒种来制造疫苗。早期的狂犬病疫苗是用成年山羊和绵羊神经组织经石炭酸或石炭酸和乙醚灭活后制成．用于犬的免疫。但免疫后不仅引起神经系统副反应，而且疫苗中残余的活毒能够引起狂犬病。1955年 Fuenialida和 Palacios将狂犬病毒脑内接种 3～5日龄的新生鼠。于接种后 4天 收集脑组织。制备了新生鼠脑疫苗。由于新生鼠脑神经组织中仅存在少量鞘磷脂，所以引发的副反应较少。在过去的 4O多年里，南美洲广泛使用此疫苗。由于神经组织疫苗注射量大，接种次数多(14针以上1，抗体产生慢、水平低，含有神经麻痹因子，易引发变态反应．而且疫苗中易残留有感染性的活病毒．因此，WHO狂犬病专家委员会已提出尽快停止使用神经组织疫苗。