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第七章 细胞质基质与细胞内膜系统;第三节 细胞内蛋白质的分选与膜泡运输
一、信号假说与蛋白质分选信号
二、蛋白质分选的基本途径与类型
三、膜泡运输
四、细胞机构体系的组装;细胞内被膜区;细胞质基质(Cytosol, Cytoplasmic Matrix );一、细胞质基质的涵义;细胞基质;根据细胞基质中各种生物大分子结构的实际数目与相对大小所绘制的细胞基质结构的示意图;The microtrabecular lattice(微梁网络) of the cytoplasmic matrix in an unextracted cell. ;基本概念
用差速离心的方法分离细胞匀浆物中个组分,先后除去细胞核、线粒体、溶酶体、高尔基体和细胞质膜等细胞器或细胞结构后,存留在上清液中的主要是细胞质基质的成分。生物化学家多称之为胞质溶胶。
?主要成分
中间代谢有关的数千种酶类、细胞质骨架结构。 ;细胞基质的成分;细胞分裂期的细胞质基质 ;细胞超微结构与生物化学等不同的侧面互相结 合来研究细胞质基质的特殊的复杂的结构体系。 ;细胞质基质与胞质溶胶 ;胞质溶胶的成分是否与细胞质基质周围溶液的成分相同? ;用差速离心的方法所获得的胞质溶胶的成分与细胞质基质周围的溶液成分有很大的不同。胞质溶胶中的多数蛋白质,特别是分子量较大的蛋白质,可能通过较弱的次级键直接或间接地结合在细胞质基质的纤维上。 ;(一)概念 ;(二)化学组成;1、是进行某些细胞生化活动的场所,糖酵解、脂肪酸合成,有些供细胞自身结构和代谢所需蛋白,如组蛋白、非组蛋白、肌球蛋白,核糖体蛋白都在游离核糖体中合成。
2、维持细胞器稳定,提供适宜离子环境
3、供应细胞器内发生反应的底物
4、对蛋白质修饰选择性降解和构象修正磷酸化与去磷酸化,糖基化,甲基化,酰基化依赖泛素标记的蛋白酶体中的蛋白质降解途径热休克蛋白HSP帮助变性或畸形蛋白质重新折叠
5、物质贮存和运输,如:膜系统和细胞骨架系统解聚后的物质均贮存于细胞质基质中,被称为“分子库”,当需重新组装时由此提供元件。;第二节 细胞内膜系统(endomembrane system)及其功能;一、细胞内膜系统概述;二、细胞内膜系统的研究方法 ;放射自显影术(Autoradiography) Secretory pathway identified by Palade et al.;3’ labeling and the immediate autoradiography
3’ labeling, 7’ chase, and autoradiography
3’ labeling, 120’ chase, and autoradiography;;EM Autoradiography;;;;;another 30 min - 1 hr : Post Golgi Vesicles labeled;;Palade’s original data;de Duve,G.Palade,分离到了但八只合成和分泌功能的结构。
细胞被破碎,膜碎片形成小囊泡,
小囊泡来自于不同的膜结合细胞器(细胞核、线粒体、质膜、内质网等)
来自于内膜系统的小囊泡称微粒体(microsome)
;;微粒体的功能研究;用酵母突变体研究分泌过程及与分泌相关的基因揭示了小泡运输过程。
;;膜结合细胞器与内膜系统 ;膜结合细胞器的种类和功能 ;膜结合细胞器在细胞内的分布 ;内膜系统的动态性质 ;内膜系统与蛋白质分选(protein sorting) ;蛋白质分选定位的空间障碍及运输方式 ;核孔运输
(transport through nuclear pore)
跨膜运输
(across membrane transport)
小泡运输
(transport by vesicles) ;一、 内质网的形态结构与功能;粗面内质网(rough endoplasmic reticulum,rER)
?多呈扁囊状,排列较整齐,内质网与核糖体共同
形成的复合机能结构,
?主要功能:合成分泌性蛋白和多种膜蛋白
?分泌细胞和分泌抗体的浆细胞中的rRE非常发
达,未分化的细胞与肿瘤细胞中较为稀少
?移位子(translocon):新合成多肽进入内质网
有关(Sec61p)
?有20余种与光面内质网不同的蛋白质;;光面内质网(smooth endoplasmic reticulum,sER)
?呈分支管状或小泡状,无核糖体附着。
?脂质合成的场所
?细胞不含纯粹的RER或SER,它们分别是ER连
续结构的一部分。
?与高尔基体结构、功能与发生上的关系密切
?驱
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