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实验目的 ：验证小鼠在接受抗原之后机体产生了特异性免疫反应， 并观察小鼠各
项生理指标以及免疫器官的反应状况， 再观察 T 细胞和 B 细胞在此应答的反应状
况。
实验假设 ：小鼠免疫灭活疫苗之后，机体会逐渐产生特异性免疫应答，一方面 T
细胞在接受抗原刺激之后，经过阳性和阴性选择， T 细胞从 CD4，CD8双阳性选
择为单阳性 T 细胞，并逐步转移，最终到达淋巴结等组织产生效应；另一方面，
B细胞也会发育分化为浆细胞和记忆细胞，相应的浆细胞产生抗体以应对抗原。
由于小鼠在接受抗原之后，免疫细胞在胸腺和脾脏内的数量和种类将发生变化，
另外小鼠血清中也会产生相应的抗体。
因此假设，在排出其他偶然因素引起的误差的情况下，有以下结果：
1. 免疫后的小鼠胸腺大小比对照组更小，脾脏大小比对照组更大；另外免疫后
小鼠的淋巴结比对照组更大。
2. 免疫后的小鼠胸腺免疫细胞数量小于对照组， 脾脏免疫细胞数量大于对照组。
3. 免疫后小鼠胸腺中的单阳性淋巴细胞比对照组单阳性淋巴细胞更多，双阳性
淋巴细胞比对照组更少； 免疫后小鼠的脾脏中单阳性淋巴细胞数量多于对照组单
阳性淋巴细胞数量。
4. 免疫后小鼠血清里面的抗体检测呈阳性，对照组小鼠血清抗体检测呈阴性。
预期结果：
预计结果与假设一致，即：
1. 免疫后的小鼠胸腺大小比对照组更小，脾脏大小比对照组更大；另外免疫后
小鼠的淋巴结比对照组更大。
2. 免疫后的小鼠胸腺免疫细胞数量小于对照组， 脾脏免疫细胞数量大于对照组。
3. 免疫后小鼠胸腺中的单阳性淋巴细胞比对照组单阳性淋巴细胞更多，双阳性
淋巴细胞比对照组更少； 免疫后小鼠的脾脏中单阳性淋巴细胞数量多于对照组单
阳性淋巴细胞数量。
4. 免疫后小鼠血清里面的抗体检测呈阳性，对照组小鼠血清抗体检测呈阴性。
实验方法：
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一、小鼠免疫后与对照组的中枢和外周免疫器官的观察
实验原理：
实验采取 DH5α灭活菌液为抗原，对小鼠进行注射，小鼠在接受抗原之后，
机体会对其产生免疫应答， 然而抗原在体内具有一定的半衰期， 重复注射可以提
高机体的免疫应答强度。 当小鼠产生特异性免疫应答之后， 机体的中枢和外周免
疫器官大小会发生变化，即表明小鼠产生的免疫应答程度。
实验材料：
1. BALB/c 小鼠： 6-10 周龄，雄鼠，清洁级，上海斯莱克实验动物有限公司
2. DH5α灭活菌液（ 个/ml ）：制备方法：将 DH5α扩增至饱和，取出
3500rpm 离心 15min，弃上清，用生理盐水重悬计数， 121℃，20min 灭活，
计数并稀释。 （3 次接种，每次 500ul ）
3. 工具： 1ml 注射器（针头），酒精棉球，眼科剪，眼科镊，眼科弯镊，废
物筒，解剖板，离心管（离心管架） ，小鼠尸体袋。
4. 试剂：生理盐水（ 3 次接种，每次 500ul ）
实验方法：
①第一次抗原免疫小鼠
1. 做好准备工作，注射器内装入 1ml DH5α灭活菌液和生理盐水
2. 腹腔注射：
小心抓起小鼠， 使小鼠腹部朝上， 用酒精棉球擦一擦， 向小鼠的中线略
左的位置，先挑其表皮，再斜向下插入 0.5-1cm 的距离，注射后拔出，用剪
刀剪去耳朵做好标记。
3. 鼠笼做好标记，等待一周后，再第二次免疫小鼠。
②第二次免疫小鼠
大约一周后，根据做好的标记，用相同的方法进行免疫，再放回鼠笼，等待
一周。
③第三次免疫小鼠
大约一周后，根据做好的标记，用相同的方法进行免疫，再放回鼠
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