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掉自
层析原理与方法
BIORAD
内容提要
1、层析原理与技术
2、层析方法
凝胶过滤层析
离子交换层析
≥羟基磷灰石层析
疏水层析
亲和层析
BIORAD
层析原理
DynaMax
Biotech
层析的起源和原理
剂
原理--用物质分配系数不同达到分离
色谐带
层析
Chromatography
色谱
层析原理
什么是蛋白层析
根据蛋白分子物理化学特性的不同而达到分离
极性/琉水性: polarity( solubility, volatility)HC,RP
离子特性; ionic characteristics( charge)∥EX
大小与形状: size/mass(diffusion, sedimentation)GF
结构特征与活性位点: shape(ligand binding, affinity)AC
这些特性的区别使不同蛋白质分子在层析的固定相和流动相的分配不同而
达到分离
BIORAD
分离机制
DynaMax
分子的大小---凝胶过滤( size-exclusion)(分子筛,分子排阻)
分子的电性--离子交换(lEc)阳离子交换、阴离子交换
分子的表面疏水结构--疏水层析(HC),反相
其它:羟基磷灰石,金属鳌合(MAc),亲和,染料配基介质层析
精制( polishing):高分辨率层析
BIORAD
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