层析原理和技术知识讲稿.pptVIP

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掉自 层析原理与方法 BIORAD 内容提要 1、层析原理与技术 2、层析方法 凝胶过滤层析 离子交换层析 ≥羟基磷灰石层析 疏水层析 亲和层析 BIORAD 层析原理 DynaMax Biotech 层析的起源和原理 剂 原理--用物质分配系数不同达到分离 色谐带 层析 Chromatography 色谱 层析原理 什么是蛋白层析 根据蛋白分子物理化学特性的不同而达到分离 极性/琉水性: polarity( solubility, volatility)HC,RP 离子特性; ionic characteristics( charge)∥EX 大小与形状: size/mass(diffusion, sedimentation)GF 结构特征与活性位点: shape(ligand binding, affinity)AC 这些特性的区别使不同蛋白质分子在层析的固定相和流动相的分配不同而 达到分离 BIORAD 分离机制 DynaMax 分子的大小---凝胶过滤( size-exclusion)(分子筛,分子排阻) 分子的电性--离子交换(lEc)阳离子交换、阴离子交换 分子的表面疏水结构--疏水层析(HC),反相 其它:羟基磷灰石,金属鳌合(MAc),亲和,染料配基介质层析 精制( polishing):高分辨率层析 BIORAD

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