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1:
1:细菌的溶菌酶破碎
细菌的溶菌酶破碎
2:
2:细菌的溶菌酶破碎和机械破碎
细菌的溶菌酶破碎和机械破碎
3:
3:细菌的机械破碎
细菌的机械破碎
4: K
4:细菌的溶菌酶裂解和蛋白酶 K 的消化
细菌的溶菌酶裂解和蛋白酶 的消化
5: K
5:细菌的溶菌酶裂解、蛋白酶 K 的消化及机械破碎
细菌的溶菌酶裂解、蛋白酶 的消化及机械破碎
6:
6:固体培养基细菌的裂解
固体培养基细菌的裂解
7: RNeasy Mini Kit RNA
7:使用 RNeasy Mini Kit从细菌溶解物中提纯总 RNA。
使用 从细菌溶解物中提纯总 。
8: RNeasy Midi Kit RNA
8:使用 RNeasy Midi Kit从细菌溶解物中提纯总 RNA。
使用 从细菌溶解物中提纯总 。
章节说明
章节说明
1-6
该手册含有两种不同类型方案。我们提供了多种方案,其中方案 1-6 是针对制备细菌溶
该手册含有两种不同类型方案。我们提供了多种方案,其中方案 是针对制备细菌溶
7-8 RNA 1-6
解物,方案 7-8 是针对如何从细菌溶解物中提取全 RNA。你需要在方案 1-6 中选择一种操作,
解物,方案 是针对如何从细菌溶解物中提取全 。你需要在方案 中选择一种操作,
7-8
而后在方案 7-8 中任选其一。
而后在方案 中任选其一。
RNA
制备细菌溶解物的各个方案都介绍了破碎细菌时如何固定 RNA。如何选择不同的实验方
制备细菌溶解物的各个方案都介绍了破碎细菌时如何固定 。如何选择不同的实验方
案由细菌细胞壁的稳定性所决定。细菌细胞壁的稳定性受多个因素影响,包括细菌种类、生
案由细菌细胞壁的稳定性所决定。细菌细胞壁的稳定性受多个因素影响,包括细菌种类、生
RNA
长阶段和培养基的成分。细菌必须完全破碎以确保 RNA 的有效提取。
长阶段和培养基的成分。细菌必须完全破碎以确保 的有效提取。
制备细菌溶解物的各个方案都包含了不止一步。
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■酶消化:细菌细胞壁可以被溶菌酶进行消化 (例如溶菌酶、溶葡球菌酶)。我们认为溶菌
■酶消化:细菌细胞壁可以被溶菌酶进行消化 (例如溶菌酶、溶葡球菌酶)。我们认为溶菌
酶的作用对于所有的革兰氏阳性、阴性细菌均是有效的。
酶的作用对于所有的革兰氏阳性、阴性细菌均是有效的。
K K RNA
■蛋白酶 K 消化:在复杂培养基上生长的细菌大部分蛋白质可以被蛋白酶 K 消化以提高 RNA
■蛋白酶 消化:在复杂培养基上生长的细菌大部分蛋白质可以被蛋白酶 消化以提高
K K
的纯化率。我们认为蛋白酶 K 对于可在复合培养基中生长的细菌均是有效的。蛋白酶 K 常常
的纯化率。我们认为蛋白酶 对于可在复合培养基中生长的细菌均是有效的。蛋白酶 常常
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