乳腺癌细胞HMGA1稳定株构建及对细胞增殖的影响.pdfVIP

乳腺癌细胞HMGA1稳定株构建及对细胞增殖的影响 胡芳琳1钟小林1陈亚军1,2,3 钟警1 摘要:目的 构建高迁移率族蛋白A1(HMGA1)表达载体 影响。结果 成功构建pcDNA3.1（-）/HMGA1载体；成功 及乳腺癌MCF7和T47D细胞HMGA1高表达稳定株，并检 建立稳定高表达HMGA1的MCF7和T47D细胞株；MTT实 测HMGA1高表达对MCF7和T47D细胞增殖的影响。方法 验结果表明MCF7和T47D细胞HMGA1高表达稳定株增殖 通过PCR扩增HMGA1基因编码框，将HMGA1编码框连 能力比对照组明显增强(P＜0.001)；克隆形成实验结果显 接于GV219[pcDNA3.1（-）]载体，经测序确认后，将pcD- 示HMGA1高表达稳定株克隆形成率明显高于对照组(P＜ NA3.1（-）/HMGA1分别转染至MCF7和T47D细胞中，再 0.001)。结论 HMGA1稳定高表达可明显促进乳腺癌 经遗传霉素(G418)筛选单克隆株并扩大培养。通过West MCF7和T47D细胞的增殖。 ernblot检测各稳定细胞株HMGA1的表达，从而筛选出HM 乳腺癌；HMGA1；细胞增殖；质粒转染 GA1稳定高表达的细胞株。实验进一步采用MTT比色法和 R737.9 细胞克隆形成实验检测HMGA1高表达对细胞增殖能力的 A 1000-1492(2019)11-1729-06 10.19405/ki.issn1000-1492.2019.11.014 2019-06-17 基金项目：国家自然科学基金 （编号；湖南省自然科学基 金 （编号：2019JJ20014）；湖南省研究生科研创新项目(编 号：C 1南华大学附属第一医院临床医学研究所，衡阳421001 2南华大学附属第二医院内分泌科，衡阳421001 3南华大学病理生理学教研室，衡阳421001 作者简介：胡芳琳，女，硕士研究生； 钟警，男，副教授，硕士生导师，责任作者，E-mail: zhongjing2002@ Expressionofthemelanoma-associatedantigen-A3(MAGE-A3) incervicalcancertissuesandcervicalcancercells ShiRuobingWangYan HeHaipeng @@[1] 孙维嘉，陈丹丹，张岳，等.乳腺癌筛查意识、行为现状及 其影响因素研究进展[J].中国妇幼保健，2018，33(20): 4798-801. @@[2] Siersb(ae)kR,KumarS,CarrollJS.Signalingpathwaysandsteroid receptorsmodulatingestrogenreceptorα functioninbreastcancer [J].GenesDev,2018,32(17-18):1141-54. @@[3] SumterTF,XianL,HusoT,etal.ThehighmobilitygroupA1 (HMGA1)transcriptomeincanceranddevelopment[J]. Curr MolMed,2016,16(4):353-93. mobilitygroup ⅠHMGI(Y)proteininthediagnosisofthyroid @@[4] LundT,HoltlundJ,FredriksenM,etal.