园艺植物育种学诱变育种精选文档.ppt

31 32 ? （一）辐射生物学作用的时相阶段 ? （二）辐射对染色体和 DNA 的作用 ? （三）植物对辐射损伤的修复 ? （四）辐射敏感性 二、辐射诱变机理 33 （一）辐射生物学作用的时相阶段 ? Dertinger 和 Jung1970 年提出， 4 个时相阶段 ? 1. 物理阶段： 电离、激发 ? 2. 物理 - 化学阶段： 自由基 ? 3. 化学阶段： 生物大分子反应 ? 4. 生物学阶段： 生化过程改变，细胞结构组成变化 34 ? 物理阶段 ：主要特征是辐射能量使生物体 内各种分子发生电离（产生自由电子）和 激发（把束缚电子激发到更高的能级）。 ? 物理 - 化学阶段 ：主要特征是通过电离的分 子重排，并产生许多化学性质很活泼的自 由基（具高能）。 35 OH . + OH . H 2 O 2 2OH . + O 2 2HO 2 . H . + O 2 HO 2 . H 2 O 辐射 H 2 O + +e - H 2 O +e - H 2 O - H 2 O + H + +OH . H 2 O - OH - +H . 36 ? 化学阶段 ：这一阶段是自由基的继发作用， 自由基与生物大分子发生反应，引起分子结 构的变化。 ? 生物学阶段 ：细胞内生物化学过程发生改变， 从而导致各种细胞器的结构及其组成发生变 化，包括染色体畸变和基因突变，产生遗传 效应。 37 （二）辐射对染色体和 DNA 的作用 ? 1. 辐射 —— 生物体 ? 直接作用：射线 → 生物大分子 ? 间接作用：射线 → 水 → 自由基 → 生物大分子 ? 2. 辐射 —— 染色体 ? 引起染色体畸变和基因突变 ；染色体数目改变 ? 3. 辐射 —— DNA ? 氢键断裂、糖与磷酸基断裂、交联现象 ? DNA 受辐射后引起的异构现象，会导致有机体 性状变异。 38 （三）植物对辐射损伤的修复 ? 生物体 —— 自我修复能力 ? 抑制修复体系，提高突变频率 ? EDTA ，咖啡因， BUdR 39 （四）辐射敏感性 ? 植物不同种类和品种，敏感性不同 ? 染色体 DNA 含量决定敏感性： DNA 含量越多越 敏感 ? 多倍体比二倍体更抗辐射 ? 植物组织器官、发育阶段和生理状态不同， 敏感性不同 ? 根 > 枝条 > 种子； ? 性细胞 > 体细胞； ? 幼龄植株 > 老龄植株 40 三、辐射处理方法 （一）照射材料的选择 ? 1. 种子 —— 使用最普遍。 ? 处理量大、便于运输、操作简单。 ? 辐射处理种子及时播种（贮存效应） ? 2. 营养器官和植株 —— 无性繁殖园艺植物常用。 ? 枝条、块茎、鳞茎、球茎等 ? 多年生果树：结果早，鉴定快。照射后嫁接或扦插 繁殖 ? 3. 花粉和子房 —— 最大优点：很少产生嵌合体 ? 4. 离体培养材料 —— 可避免和减少嵌合体的形成。 ? 辐射单倍体诱发突变，无论显隐性，都能在细胞水平或 个体水平上表现出来，经加倍可获得二倍体纯系。 41 （二）适宜剂量及剂量率的选择 ? 1. 在一定范围内增加剂量可以提高突变和突 变谱，但超过一定范围后增加剂量会降低成 活率和增加不利突变率。 ? 2. 剂量选用原则 ： ? 活 —— 后代有一定成活率 ? 变 —— 在成活个体中有较大的变异效应 ? 优 —— 变异的个体中有较多有利变异 42 ? 临界剂量 －－被照射材料的存活率为对照 的 40 ％的剂量值。 ? LD50( 半致死剂量 )--- 辐照后存活率为对照 的 50 ％的剂量率。 ? 高剂量 —— 造成大量死亡；选择几率降低； 造成染色体损伤较大，导致有害突变比例 大大增加。 ? 预备实验： 不同剂量梯度，枝条辐射后插 于瓶内， 20 ℃ 3 ～ 4 周，统计萌芽率。 43 （三）辐射处理方法的选择 ? 1. 外照射 —— 材料不含辐射源，环境无污染 ， 首选 ? 急性照射 —— 短时间内完成总照射剂量 ? 慢性照射 —— 较长时间内完成总照射剂量 ? 重复照射 —— 几个世代中连续照射 ? 2. 内照射 —— 剂量低，持续时间长，多数植物可在 生育阶段进行；蜕变效应； 需要防护 ? 浸泡法 ? 注射或涂抹法 ? 饲喂法（或施肥法） 44 第三节 化学诱变 ? 一、常用化学诱变剂及其机理 ? 二、化学诱变方法 ? 三、影响因素 ? 有关化学物质： 具诱发基因突变和染色体断 裂效应，使生物产生遗传性变异的化学药剂 种类有： 秋水仙素，烷化剂类，核酸碱基类 似物及其他诱变剂。 45 一、常用化学诱变剂及其机理 ? （一）烷化剂 —— 最重要的一类诱变剂 ? 带有一个或多个活泼的烷基 ? 通过烷基置换取代其他分子的氢原子“烷化作 用” —— 作用机制 ? 它们借助于磷酸、嘌呤、嘧啶基的烷化而与 DNA 或 RNA