药物中有机残留溶剂分析仪气相色谱仪检测溶剂残留.pdf

药物中有机残留溶剂—气相色谱法 南京科捷分析仪器有限公司 药品中的残留溶剂是指在合成原料、辅料或制剂生产过程中使用或产生的挥发性有机化 学物质。他们在生产过程中未能被全部清除,服用后对人体有毒性和致癌作用,近年来日益引 起各方面的重视,在新药研究中要求越来越严格。我国在1995 年药典也规定7种限制溶剂残 留项2 ,在2000 年药典中3 ,根据ICH 的限度要求对这7 种溶剂残留限量进行调整。ICH 要求检 测的溶剂就有69 种,虽然我国药典并未要求按ICH的规定实施,但在新药研究中对于残留溶剂 的要求事实上是参照ICH 的规定执行的。这是SDA 对新药研究从严从高要求的体现,也是与国 际接轨,适应WTO规则的需要。在实际工作中,药品的合成、制剂、消毒工作涉及到的有机溶 剂有上百种,气相色谱法是中国药典对有机残留溶剂测定的法定检测方法,也是检测有机溶 剂的最常用、最适用的方法之一. 1 　气相色谱法 111 　样品的处理 一般是将样品溶于适当的溶剂中,能达到的浓度越高越好,以利于残留量极微溶剂的测定。由 于样品复杂多样,为提高样品浓度,所用溶剂也是多种多样。一般常用溶剂为水、二甲基甲酰 胺 (DMF) 、二甲亚砜(DMSO) ,也有用四氯化碳4 、二甲基乙酰胺、乙醇5 、正己烷、二氧六环、 乙酸、甲氧基乙醇6 、氢氧化钠溶液7 、十二烷基磺酸钠溶液8 等的,不一而足。大部分为单独 使用,也有的混合使用,主要目的就是增加样品溶解度。所用溶剂与所测溶剂应达到较好的分 离。其中二甲基甲酰胺、二甲亚砜因其溶解范围广,溶解性好,素有“能溶剂”之称,是最常 用的溶剂。需要注意的是,样品一定要溶清,保证所测组分都溶解在溶剂中。在一段时间里, 曾将不溶性样品用水等溶剂超声提取、离心,取上清液进样9 ,10 ,后来发现这样不能提取完全, 影响测定结果,不尽合理。所以在后来的新药报批中均要求将样品溶清后进样,这在溶剂残留 测定中是一大发现和进步。直接进样的样品取一定量溶液进样测定即可,顶空进料的样品需 要在进样前保温一定时间,使气液或气固两相达到分配平衡,然后再进行测定。 对于液体样品来说,可以将对照品定量加入到样品中制成对照品溶液,与样品溶液同时进 样,要求样品溶液的残留溶剂峰面积的两倍不得超过对照峰面积。蒋海松、关大卫用此法测 定壬苯醇醚中二恶烷的残留量11 ,何培孝、樊庆银测定壬苯醇醚中二氧六环的限量12 ,结果与 部颁标准一致,相比而言方法更加简便、准确、可靠。有的样品需要经过萃取、吹扫- 捕集 等富集,浓缩方法处理,使待测组分达到一定的浓度后再进样测定,可以使结果更准确,一般 用于微量残留溶剂或限度要求较高的溶剂如苯的测定。蔡春、关景华用吹扫- 捕集方法13 ,测 定硬膏剂中甲苯残留量。具有自动化程度高,回收率好等优点。陈晓莉在吉非罗齐中残留醚 化物及其它杂质的定量分析中,先将样品溶解于氢氧化钠溶液中,再用正己烷提取,取得满意 的结果14 。 112 　定量方法 用色谱峰定量的标准技术分为四种15 ,分别为面积归一化法、标准物添加法、外标法、内 标法。前两种方法很少见到,一般用后两种方法。中国药典2000 年版规定两种方法均可,美 国药典24 版(US2PXXIV) 16 、英国药典2000 年版(BP2000) 17均要求用外标法。内标法不要求 所有组分都完全分离、流出和检测出来。它只需将要分析的峰与内标物完全分离即可。内标 物必须符合下列要求:在样品中原来没有内标物的存在;内标物必须与所有样品组分完全分 离;内标物的流出时间应尽量接近待分析组分;内标物应与待分离的物质具有相近的浓度、物 化特性和检测器的响应值;内标物必需稳定、不起化学反应、纯度高、挥发性应很低以允许 长期保存并且在注样过程中损失最小。待测样品可以是一个或一个以上。本方法可以消除仪 器与操作造成的误差。外标法是用待测组分的峰面积和峰高与一系列已知的(或外加的) 标 准样相比较。标准浓度与待测组分浓度的浓度量级应相同。样品与标准品进样浓度与色谱条 件应完致,标准曲线的浓度范围应包括全部样品中待测溶剂的浓度。标准曲线应由同样体积 的标准物作出。一般适用于进样重复性较好的样品。 113 　进样方式 气相色谱法的进样方式一般分顶空进样和直接进样两种。顶空进样又分为溶液顶空和固 体顶空。前者就是将样品溶解于适当溶剂中,置顶空瓶中保温一定时间,使残留溶剂在两相中 达到气液平衡,定量取气体进样测定。固体顶空就是直接将固体