试验直接滴定法测还原糖.ppt

还原性糖概念： 还原糖是指具有还原性的糖 类。在糖类中，分子中含有游离醛基和酮基的单 糖和含有游离醛基的二糖都具有还原性。 还原糖 包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、 麦芽糖等。 非还原糖 有蔗糖、淀粉、纤维素等， 但它们都可以通过水解生成相应的还原性单糖。 所以 糖类的测定是以还原糖的测定为基础的 。 1. 实验原理 将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量 混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这 种沉淀很快与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色 的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。在加热条件 下，以次甲基蓝作为指示剂，用样液滴定， 样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生 成红色的氧化亚铜沉淀，待二价铜全部被 还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原， 溶液由蓝色变为无色，即为滴定终点。根 据样液消耗量可计算还原糖含量。 当称样量为 5g 时，该法的检出限为 0.25g/100g （ 1 ） Cu· SO 4 + 2NaOH = 2Cu(OH) 2 + Na 2 SO 4 Cu(OH) 2 + COOK CHOH COONa CHOH （ 2 ） = COOK CHO COONa CHO ＞ Cu + 2H 2 O （ 3 ） = COOK CHO COONa CHO ＞ Cu + 3Cu 2 O CHO (CHOH) 4 CH 2 OH + COOH (CHOH) 3 CH 2 OH 6 + 6H 2 O COOK CHOH COONa CHOH + 6 + H 2 CO 3 （ 4 ） 2. 适用范围与特点 本法又称快速法，它是在蓝 - 爱农容量法 基础上发展起来的，其特点是试剂用量少， 操作和计算都比较简便、快速，滴定终点明 显。适用于各类食品中还原糖的测定。但测 定酱油、深色果汁等样品时，因色素干扰， 滴定终点常常模糊不清，影响准确性。 本法 是国家标准分析方法。 3. 实验材料、仪器与试剂 实验材料： 苹果 仪 器： 分析天平、研钵、电炉、铁架 台、锥形瓶、烧杯、玻棒、容 量瓶、移液管、 酸式滴定管 。 试 剂： （ 1 ）碱性酒石酸铜甲液： 称取 15g 硫酸铜 (CuSO 4 · 5H 2 O) 及 0.05g 次甲基蓝，溶于水中并稀 释至 l000 mL 。 （ 2 ）碱性酒石酸铜乙液： 称取 50g 酒石酸钾钠及 75g 氢氧化钠，溶于水中，再加入 4g 亚铁氰化钾 ，完全溶解后，用水稀释至 1000mL 贮存于橡胶 塞玻璃瓶内。 （ 3 ）乙酸锌溶液： 称取 21.9g 乙酸锌，加 3mL 乙 酸，加水溶解并稀释至 l00mL 。 （ 4 ） 10.6% 亚铁氰化钾溶液： 称取 l0.6g 亚铁氰 化钾，加水溶解并稀释至 l00mL 。 （ 5 ）葡萄糖标准溶液： 准确称取 l.0000g 经过 96 ± 2 ℃ 干燥 2h 的纯葡萄糖，加水溶解后加入 5mL 盐酸，并以水稀释至 l000mL 。此溶液每毫 升相当于 1.0mg 葡萄糖。 4. 实验步骤 （ 1 ）样品处理： 称取约 5.00g 试样，置于 250mL 容量瓶中，加 50mL 水，混匀，慢慢加 入 5 mL 乙酸锌溶液及 5mL 亚铁氰化钾溶液， 加水至刻度，混匀，沉淀，静置 30min ，用干 燥滤纸过滤，弃去初滤液，取续滤液备用。 （ 2 ）标定碱性酒石酸铜溶液： 吸取碱性洒石酸 铜甲乙液各 5.0mL ，置于 150mL 锥形瓶中，加水 10mL ，加入玻璃珠 3 粒。从滴定管滴加约 9mL 葡 萄糖标准溶液，控制在 2min 内加热至沸，趁热 以每 2 秒 l 滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直 至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录消耗葡萄糖标 准液的总体积，平行操作三份，取其平均，按下 式计算。 F= c × V F ： 10mL 碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量， mg c ：葡萄糖标准溶液的浓度， mg/mL V ：标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积， mL （ 3 ）试样溶液预测： 吸取 5.0mL 碱性洒石酸铜 甲液及 5.0mL 乙液，置于 150mL 锥形瓶中，加水 10mL ，加入玻璃珠 3 粒，控制在 2min 内加热至 沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加试 样溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅 时，以每 2 秒 1 滴的速度滴定，直至溶液蓝