空调部件表面微生物、冷却(凝)水中嗜肺军团菌、血清1型(LP1)检测方法.pdf

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DB11/ 485—2011 EE 附 录 E (规范性 附录 ) 空调部件 表面 微生物 检 验方 法 E.1 采样 E.1.1 采样 点 在 清 洗后 确 定检测的 每 套 空调系统的空调部件 选择 至 少5个 代表性 采 样 点 。 E.1.2 采样 面 积 2 每 一 点采样 面积 应为 50cm 。 E.1.3 采样 方 法 空调部件表面积尘 较 多 时用刮拭 法 采样 。积尘 较 少不 适 宜刮拭 法 采 样 时 ,用擦拭 法 采 样 。整 个 采样 过 程应 无 菌操作 。 E.2 样品 检测 E.2.1 刮 拭法 将 采 集 的积尘 样品 无菌操 作 称取 1g,加入 到0.01%Tween-80水 溶液 中,做 10倍梯 级稀 释 , 取 适 宜稀 释 度 1Ml倾 注法 接 种 平皿 。 E.2.2 擦拭 法 将 擦拭 物无 菌操 作加 入 到0.01%Tween-80水 溶液 中,做 10倍梯 级稀 释 ,取适 宜稀 释度 1ml倾注 法 接 种 平 皿 。 E.3 培养与计 数 细 菌和 真菌 培养 与计 数 方法 见 附录 C。 18 DB11/ 485— 2011 附 录 F (规范性 附录 ) 空调系统 冷却(凝)水 中嗜肺军团菌检 验 方法 F.1 原理 F.1.1 待 测水 样 经 过滤 膜 或 离 心浓 缩 后 ,一 部 分 样品 经 酸 处 理与热处 理 , 以减少 杂 菌生 长 , 一 部 分 样 品不作 处 理 。 F.1.2 将 上述 处 理 与 未处 理 样品 分 别 接 种BCYE琼脂 平 板 并进行 培养 ,生 成 典 型菌 落 并 经 生化 培养 和血 清 学实 验 鉴 定确 认 则 判定 为 嗜肺军团菌。 F.2 主 要 仪器设 备 主要 仪器 设备 如下 : —— 90mm的平 皿 ; —— 35℃~37 ℃的二 氧 化碳培养 箱 ; —— 波长 为 360nm±2nm的紫 外 灯 ; —— 滤膜 滤 器 ; —— 孔径 为 0.22 μm~0.45 μm的滤 膜 ; —— 蠕动 泵 ; —— 离心机; —— 涡旋振荡 器 ; —— 普通 光 学显 微 镜 ; —— 荧光 显微 镜 ; —— 体式 镜 ; ——水 浴 箱 。 F.3 采样 F.3.1 采 样容 器 :可 选择 玻璃 瓶或 聚乙烯瓶 ,沉 积物 与 软泥需 用 广 口瓶 ,容 器均 需螺 口或磨 口,用前 灭 菌。 F.3.2 采 样量 :每 个采 样 点 依无 菌操 作取 水 样 (或 沉 积物 、 软泥 等样品 )约200ml 。 F.3.3 中和 :经 氯 或 臭 氧等 消毒 的样品 ,采 样容 器 灭 菌前 加 入 硫 代硫 酸钠溶液 以中和 样品 中的氧 化物。 F.3.4 样品 运 输与 贮存 :样品 应 2天 内送达 实验 室 ,运 输 时应避 光 和防 止受 热 ,不需冷 冻 ,室温 下贮 存 不应 超过 15天 。 F.4 样品 处理 F.4.1 沉淀 或 离 心: 杂 质可 静置 沉淀 或 1000r/min 离 心 1min去 除。 F.4.2 过滤 :将 经沉淀 或 离心 的样品 通 过 孔径 0.22 μm~0.45 μm滤 膜过滤 ,取下滤 膜 置于 15ml灭菌水中, 充 分洗 脱 ,备用。

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