台湾金线莲丛生芽的诱导与增殖研究.pdf

台湾金线莲丛生芽的诱导与增殖研究 一般植物组织培养都经过原球茎一丛生芽一生根壮苗 3 个阶段，而在台湾金线莲的组织培养过程中，未见经原球茎 阶段的报道。台湾金线莲组织培养过程不经过原球茎阶段， 直接诱导产生丛生芽，可加快其繁殖速度，有利于优良种源 的繁殖与保存。因此，探索丛生芽途径的研究，在台湾金线 莲快速繁殖过程中，就显得十分必要。该试验对台湾金线莲 组织培养所用的外植体和培养基进行筛选，以期找到诱导能 力较强的最佳外植体和培养基，提高其繁殖倍数，加快繁殖 速度，实现金线莲工厂化育苗和大规模生产；同时对外植体 的接种密度进行了考察。 1 材料与方法 1.1 材料 以重庆科技学院生物资源与制药工程研究所 组织培养室的台湾金线莲无菌苗为材料。 1.2 方法 1.2.1 不同外植体和培养基对丛生芽的诱导影响。分别 以无菌苗的顶芽茎段、带 1 个节的中部茎段和带 1 个节的基 部茎段为外植体，每段长约 0.5~ 1.0 cm ，分别接种于 MS、 B，N6、1/2MS 4 种不同的基本培养基上，各种基本培养基均 附加 6-BA 2.0 mg/L+ NAA l.0 mg/L+ 蔗糖 30 g/L+ 琼脂 7g/ L，pH 6.0 。每个处理接种 5 瓶，每瓶接种 8 个外植体。分 别于接种后 30 、45 、60d 观察记录在不同基本培养基上不同 部位外植体诱导丛生芽的情况。 培养室温度为 26~ 28 ℃，光 照强度 1 500~1 800 lx ，光照时间 12 h/d 。诱导率 =诱导芽 数／接种数。 1.2.2 不同激素浓度对丛生芽的诱导影响。 以 MS为基本 培养基（附加蔗糖 30 g/L+ 琼脂 7 g/L ，pH 6.0 ），带节基 部茎段为接种材料，考察生长调节剂 6-BA 和 NAA不同浓度 比对其诱导不定芽的影响，每因素均设 3 个处理水平。每玻 璃瓶接种 8 个外植体，每处理每次接种 5 瓶。培养室温度为 26-28 ℃，光照强度 1 500~1 800 lx ，光照时间 12 h/d 。60 d 后统计诱导率，诱导率 =诱导芽数／接种数。 1.2.3 不同接种密度对丛生芽的诱导影响。以无菌苗基 部茎段为外植体， 接种于 MS培养基上， 培养基中附加 6-BA l.0mg/L+ NAA l.0 mg/L+ 蔗糖 30 g/L+ 琼脂 7g/L ，pH 6.0 。 每玻璃瓶分别接种 6、8、 10、 12 个，每处理接种 5 瓶。培 养室温度为 26—28 ℃，光照强度为 1500~1 8001x ，光照时 间为 12 h/d 。60 d 后统计诱导率，诱导率 =诱导芽数／接种 数。 2 结果与分析 2.1 不同部位外植体不同培养基对丛生芽诱导影响 由 表 1 可知，在 MS培养基上，不同部位外植体对丛生芽的诱 导效果不同。在诱导初期