透析袋使用前如何处理.pdf

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。 透析袋在使用前如何处理 透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。 在生物 大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和 浓缩样品等都要用到透析的技术。 透析只需要使用专用的半透膜即可完成。 通常是将半透膜制成袋状, 将 生物大分子样品溶液置入袋内, 将此透析袋浸入水或缓冲液中, 样品溶 液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内, 而盐和小分子物质不断扩 散透析到袋外, 直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。 保留在透析袋内 未透析出的样品溶液称为 “保留液 ”,袋(膜)外的溶液称为 “渗出液 ” 或 “透析液 ”。 透析的动力是扩散压, 扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。 透析 的速度反比于膜的厚度, 正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓 度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是 4 ℃透析,升高温度可加快 透析速度。 透析膜可用动物膜和玻璃纸等, 但用的最多的还是用纤维素 (再生纤维 素 RC、纤维素酯 CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国 光谱医学公司 (spectrum ,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约 总经销)和美国 Union Carbide (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器 科技有限公司是华东区特约经销商) 生产的各种尺寸的透析管, 截留分 子量 MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量, 缩写为 MwCO) 大概有 100、500、 1000、2000、3500、8000、10000、 15000、20000、 。 1 。 25000、50000、100000、250000、500000、1000000 等种类,单位为道 尔顿( D)。 商品透析袋制成管状,其扁平宽度为 8 mm~ 77 mm不等。为防干裂,出 厂时都用 10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些 具有紫外吸收的杂质, 它们对蛋白质和其它生物活性物质有害, 用前必 须除去。 透析膜可用动物膜和玻璃纸等, 但用的最多的还是用纤维素制成的透析 膜,目前常用的是美国 Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光 谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量 MwCO(即留在透析 袋内的生物大分子的最小分子量)通常为 1 万左右。 截留分子量越大也就是说透过性越大, 一般而言, 透析袋截留分子量越 小价格越贵,因为截留的分子越小要求透析袋越密,价格越贵。 透析袋使用前处理: 1. 把透析袋剪成适当长度( 10-20cm)的小段。 2. 在大体积的 2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0) 中将透析袋 煮沸 10 分

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