蛋白相关试剂、缓冲液的配制方法.pdf

精品文档 蛋白相关试剂、缓冲液的配制方法 20% （W/V） Glucose 配制量 100ml 配制方法 : 1. 称取 20 g Glucose 置于 100～200 ml 烧杯中，加入约 80 ml 的去离子水后，搅拌溶解。 2. 加去离子水将溶液定容至 100 ml 。 3. 高温高压灭菌后， 4 ℃保存。 0.5 M EDTA （pH8.0 ） 配制量 1 L 配制方法 : 1. 称取 186.1 g Na2EDTA?2H2O，置于 1 L 烧杯中。 2. 加入约 800 ml 的去离子水，充分搅拌。 3. 用 NaOH调节 pH值至 8.0 （约20 g NaOH）。 4. 加去离子水将溶液定容至 1 L 。 5. 适量分成小份后，高温高压灭菌。 6. 室温保存。 注意： pH值至 8.0 时， EDTA才能完全溶解。 1 M DTT 配制量 50ml 配制方法 : 1. 称取 7.71g DTT ，加入到 100ml 烧杯中。 。 1 欢迎下载 精品文档 2. 加 50 ml 的 0.01 M NaAc （pH5.2），溶解后根据使用情况 0.22um 滤膜过滤除菌。 3. 适量分成小份后， -20 ℃保存。 30%丙烯酰胺（ 29：1） 配制量 1 L 配制方法 : 1. 量取下列溶液，置于 1 L 烧杯中。 Acrylamide 290g Bisacrylamide 10g 2. 向烧杯中加入约 600 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 加去离子水将溶液定容至 1 L ，用 0.45um 滤膜滤去杂质。 4. 于棕色瓶中 4℃保存。 注意：丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用具 有积累性，配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎 操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。 5 ×Tris- 甘氨酸电泳缓冲液 组份浓度 0.125 M Tris, 1.25 M Glycine, 0.5% （W/V）SDS 配制量 1 L 配制方法： 1．称量下列试剂，置于 1 L 烧杯中。 2．取下列溶液，加入烧杯中。 。 2 欢迎下载 精品文档 Tris 15.1g Glycine 94g SDS 5g 3. 加入约 800 ml 的去离子水，搅拌溶解。 4. 加去离子水将溶液定容至 1 L 后，室温保存。 4 ×SDS-蛋白上样缓冲液 组份浓度 Tris-HCl （pH6.8） 200mM SDS 8% 溴酚蓝 0.4% 甘油 40% 巯基乙醇 4% 配制量 10ml 配制方法： 1. 量取下列试剂，置于 10 ml 塑料离心管中。 Tris-HCl （pH6.8） 2ml SDS 0.8 溴酚蓝 40mg 甘油 4ml 2. 加去离子水溶解后定容至 10 ml 。 3. 小份（ 500 ml/ 份）分装后，于室温保存。 4. 使用前将 20ul 的 β- 巯基乙醇加到每小份中。