二磺酸酚分光光度法知识点解说.doc

二磺酸酚分光光度法知识点解说 一.应用范围 （1）本法适用测定生活饮用水及其水源水中硝酸盐氮的含量。 （2）水中常见的氯化物、亚硝酸盐和铵等均可产生干扰，需对水样作预处理。 （3）本法最低检测量为1μg硝酸盐氮。若取25 mL水样测定，则最低检测浓度为0.04mg／L。 二.原理 利用二磺酸酚在无水情况下与硝酸根离子作用，生成硝基二磺酸酚，所得反应物在碱性溶液中发生分子重排，生成黄色化合物，在420 nm波长处测定吸光度，测定硝酸盐氮的含量。 三.仪器 50mL具塞比色管、蒸发皿、250mL三角瓶、分光光度计。 四.试剂 （1）硝酸盐氮标准贮备溶液：称取7.218g在105～110℃烘过1h 的硝酸钾（KNO3），溶于纯水中，并定容至1000 mL。加2 mL氯仿作保存剂，至少可稳定6个月。此贮备溶液1.00 mL含1.00mg硝酸盐氮。 （2）硝酸盐氮标准溶液：吸取5.00 mL硝酸盐氮标准贮备溶液，置于瓷蒸发皿内，在水浴上加热蒸干，然后加入2 mL二磺酸酚，迅速用玻璃棒摩擦蒸发皿内壁，使二磺酸酚与硝酸盐充分接触，静置30min，加入少量纯水，移入500 mL容量瓶中，再用纯水冲洗蒸发皿，合并于容量瓶中，最后用纯水稀释至刻度。此溶液1.00 mL含10.0μg硝酸盐氮。 （3）苯酚：如苯酚不纯或有颜色，将盛苯酚（C6H5OH）的容器隔水加热，融化后倾出适量于具空气冷凝管的蒸馏瓶中，加热蒸馏，收集182～184℃的馏分，置棕色瓶中，冷暗处保存。精制苯酚应为无色纯净的结晶。 （4）二磺酸酚试剂，称取15g苯酚，置于250 mL 三角瓶中，加入105 mL浓硫酸，瓶上放一小漏斗，置沸水浴内加热6h。试剂应为浅棕色稠液，保存于棕色瓶内。 （5）硫酸银标准溶液：称取4.397g硫酸银（Ag2SO4），溶于纯水中，并用纯水定容至1000 mL。此溶液1.00 mL可与1.00mg氯离子作用。 （6）0.5mol/L硫酸溶液：取2.8 mL浓硫酸，加入适量纯水中，并稀释至100 mL。 （7） 1mol／L氢氧化钠溶液：称取40g氢氧化钠（NaOH），溶于适量纯水中，并稀释至1000 mL。 （8） 0.02mol／L高锰酸钾溶液：称取0.316g高锰酸钾（KMnO4），溶于纯水中，并稀释至100 mL。 （9）乙二胺四乙酸二钠溶液：称取50g乙二胺四乙酸二钠（C10H14N2O8Na22H2O，简称EDTA2Na），用20 mL纯水调成糊状，然后加入60 mL浓氨水充分搅动，使之溶解。 （10）浓氨水。 （11）氢氧化铝悬浮液。 五.步骤 （1）预处理 在计算水样体积时，应将预处理时所加各种溶液的体积扣除。 ①去除浊度：如水样中有悬浮物，可用0.45μm 孔径的滤膜过滤除去。 ②去除颜色：如水样的色度超过10度，可于100 mL水样中加入2 mL氢氧化铝悬浮液，充分振摇后静置数分钟，再行过滤。弃去最初滤出的少量水样。 ③去除氯化物：将100 mL水样置于250 mL三角瓶中，根据事先已测出的氯离子含量，加入相当量的硫酸银溶液。水样中氯化物含量很高（超过100mg／L）时，应该以1mg Cl-需加4.397mg Ag2SO4计算直接加入固体硫酸银（为了防止银离子的加入量多于水样中氯离子量给测定带来干扰，在计算银离子加入量时，可按保留水样中1mg／L氯离子的量计算）。将三角瓶放入80℃左右的热水中，用力振摇，使氯化银沉淀凝聚，冷却后用慢速滤纸过滤或离心，使水样澄清。 注：水中氯离子在强酸条件下与NO3-反应，生成NO或NOCl，使NO3-损失，结果偏低，因此必须除去Cl-。 用硫酸银除去氯离子时，如银离子过量，则在最后发色时生成的颜色不正常或变浑浊。 ④扣除亚硝酸盐氮影响：如水样中亚硝酸盐氮含量超过0.2mg／L，则需先向100mL水样中加入1.0 mL 0.5mol／L硫酸溶液， 混匀后滴加0.02mol／L高锰酸钾溶液，至淡红色保持15min 不褪为止，使亚硝酸盐转变为硝酸盐。在最后计算测定结果时，需减去这一部分亚硝酸盐氮(用重氮化偶合分光光度法测定）。 （2）测定　 ①吸取25.0 mL（或适量）原水样或经过预处理的澄清水样，置于100mL蒸发皿内，用pH试纸检查，滴加氢氧化钠溶液，调节溶液至近中性，置于水浴上蒸干。 ②取下蒸发皿，加入1.0 mL二磺酸酚试剂，用玻璃棒研磨，使试剂与蒸发皿内残渣充分接触，静置10min。 ③向蒸发皿内加入10 mL纯水，在搅拌下滴加浓氨水，使溶液显出的颜色最深。如有沉淀产生，可过滤，或者滴加乙二胺四乙酸二钠溶液至沉淀溶解。将溶液移入50 mL比色管中，用纯水稀释至刻度，混合均匀，测定其吸光度。 ④ 另取50 mL比色管，分别加硝酸盐氮标准溶液0、0