第九章第十章 体细胞无性系变异及突变体筛选资料讲解.ppt

第二节 植物细胞突变体的筛选 二 、植物 细胞突变体 筛选 的发展由来 ? 以 细胞 培养物 作为操作对象进行 突变体 筛选 研究 是和 组织培养技术 的发展密切关联的。 ? 上世纪五十年代末期，揭示 植物细胞全能性 的技 术完成后，使 突变体 的 筛选 工作可以在 细胞 水平上 进行。以培养 细胞 进行 突变体 筛选 研究工作始于 1964 年，由 Tulecke( 培莱克 ) 首先从 银杏 花粉 培养 物中分离出需要 精氨酸 的 细胞 突变体 。 ? 1970 年， Carlson （卡尔森）、 Heimer （海曼） 和 Binding （宾迪）等人分别从 烟草 和 矮牵牛 的细 胞中分离出几种 营养缺陷型 细胞 及 抗苏氨酸 和 抗链 霉素 的 细胞 突变体 ，才逐渐拉开了筛选和利用细胞 突变体研究之惟幕。 第二节 植物细胞突变体的筛选 二 、植物 细胞突变体 筛选 的发展由来 ? 此后二十余年来，不断报道了具有各种明确目的性的 细胞突变体 的 筛选 研究，主要是各种 抗性 细胞突变体 的 筛选 ，如 抗病 、 抗除草剂 、 抗 （ 盐碱 、 酸壤 、 重金属离 子 、 干旱 、 低温 等）逆境的各种 细胞突变体 、 营养缺陷 型 以及为提高细胞 氨基酸 的含量而进行 抗氨基酸 及其类 似物的 细胞突变体 的筛选等等。 ? 至 80 年代，由于对筛选技术及表型变异传递规律和 机理均有较深入的研究。因此， 细胞突变体 的研究获得 几百个抗性变异株，分别属于 14 个科的 44 个种选择出 来的 211 种表型（表 14-5 ），其中各个种总共 90 个变 异系表型能再生植株。 第二节 植物细胞突变体的筛选 二 、植物 细胞突变体 筛选 的发展由来 ? 可以认为，高等植物 细胞突变体 的筛选 与利用的研究，是 离体培养技术 高度发 展与 细胞工程 和 分子遗传学 高度结合的 产物，是植物生物工程中创建新种质资 源的一个组成部分。 第二节 植物细胞突变体的筛选 三 、利用培养的 细胞 诱变 与 筛选 突变体 的 优 缺点 ? 1 、 优越性 ：（ 3 点） ? （ 1 ） 该系统提供大量可供选择各种变异类型的群 体，筛选方便 。 ? 例如 ，在一个培养皿中可以也容易培养与处理 5 × 10 5 个细胞并从中筛选突变体，倘若在大田中 种植相同数量的植株则需要 0.6 公顷的土地。 （ Scoworoft,1978 ） ? （ 2 ） 诱变效率高，筛选的时间短 。用植物细胞， 特别是单倍体细胞，在细胞水平上直接诱发与筛选 植物细胞突然袭击变体，不仅能应用微生物诱变与 筛选的技术快速获得突变体，还能防止与限制形成 嵌合体。有时可达到几乎是同质的水平。 第二节 植物细胞突变体的筛选 三 、利用培养的 细胞 诱变 与 筛选 突变体 的 优 缺点 ? 例如 ， WEBER 和 Lark(1979) 仅 7 天就从 大豆 培 养细胞中筛选出 抗 8- 氮鸟嘌呤 的 突变体 ，而且从单 倍体细胞还能较容易地筛选出隐性的突变。 ? （ 3 ） 整体植物各种突变体是以观察可见特征为手 段而鉴别 。 ? 当 突变 是某些特异性无化功能改变时，一般不能 进行有目的选择，因此在植株水平上研究突变的分 子基础难以实现，只有在培养的细胞中选择 突变体 才有利于研究突变的分子基础。还可以从 细胞突变 体 的细胞学与生物化学变化一直研究到再生植株性 状的遗传与变异。 第二节 植物细胞突变体的筛选 三 、利用培养的 细胞 诱变 与 筛选 突变体 的 优 缺点 ? 2 、 不利处 ：（ 3 点） ? （ 1 ）在 细胞水平 上筛选的 突变 不一定都能在 植物 水平 上表达； ? （ 2 ）与 微生物 相比， 植物细胞群体 增殖速率慢得 多，需时长； ? （ 3 ）除 原生质体 和 花粉粒 外，难以得到完全是 单 细胞 的材料。 ? 可以认为，高等植物 细胞突变体 的筛选与利用之 研究，是离体培养技术高度发展与细胞工程和分子 遗传学高度结合的产物，是植物生物工程中创建新 种质资源的一个组成部分。 第二节 植物细胞突变体的筛选 四 、离体培养 细胞突变体 的判断 标准 和 分类 ? 筛选出来的变异是能 遗传的变异 ，抑或是性状不 稳定的 后生改变 （ epigenetix changes ），这是 突变性筛选方面必须搞清楚的问题。 ? 1 、 判断 标准 ： ? 以 Widholm(1977) 和 Maliga(1976) 提出的判 断标准综合为 4 点： ? （ 1 ） 遗传 方式 ：变异性状能通过再生植株有性传 递给后代，这是突变最有力的证据。通常 核 DNA 突 变会产生 孟德尔式分离 ，而 叶绿体 和 线粒体 DNA 的 突变则是 母体遗传方式 。 第二节