大鼠(Rat)血管内皮生长因子(VEGF)-NEWA.pdf

精品文档 本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断 地分离。 大鼠（ Rat ）血管内皮生长因子（ VEGF ） 2. 血浆： EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。 3000 转离心 30 分钟取上 ELISA 检测试剂盒 清。 使用说明书 3. 细胞上清液： 3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。 检测原理 4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。 3000 转离心 10 分 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ ELISA）。往 钟取上清。 预先包被血管内皮生长因子（ VEGF）抗体的包被微孔中，依次加入 5. 保存：如果样本收集后不及时检测， 请按一次用量分装， 冻存于 标本、标准品、 HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底 -20 ℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 物TMB 显色， TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作 自备物品 用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血管内皮生长因子 1. 酶标仪（ 450nm ） （VEGF）呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（ OD 2. 高 精 度 加 样 器 及 枪 头 ： 0.5-10uL 、 2-20uL 、 20-200uL 、 值），计算样品浓度。 200-1000uL 样品收集、处理及保存方法 3. 37 ℃恒温箱 1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管， 操作过程中避免任何细胞 操作注意事项 刺激，收集血液后， 3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心 1. 试剂盒保存在 2-8 ℃，使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的 随意编辑 精品文档 浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解 底物 B 6mL 3mL 无 后再使用。 终止液 6mL 3mL 无 2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中， 密封 （低温干燥）保存。 封板膜 2 张 2 张 无 3. 浓度为 0 的 S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明 说明书 1 份 1 份 无 书操作时样本已经稀释 5 倍，最终结果乘以 5 才是样本实际浓度。 自封袋 1 个 1 个 无 4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 注：标准品（ S0-S5 ）浓度依次为： 0 、20 、40 、80 、 160 、320 pg/mL