发酵工程课件.docVIP

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绪论 重点、难点:微生物发酵的纯培养技术和深层培养技术;发酵工程的产业化及其发展前景。 发酵工程是生物技术的重要组成部分,是生物技术产业化的重要环节。 定义:它是应用微生物学等相关的自然科学以及工程学原理,利用微生物等生物细胞进行酶促转化,将原料转化成产品或提供社会性服务的一门科学。由于它以培养微生物为主,所以又称为微生物工程。 青霉素1U:为能在50ml肉汤培养基中完全抑制金黄色葡萄球菌标准菌株发育的最小青霉素剂量。 链霉素1U:为能在1ml肉汤培养基中完全抑制大肠杆菌发育所需的最小链霉素的剂量。 新霉素1U:为能抑制1ml肉汤培养基中大肠杆菌(ATCC9637)发育所需的最小剂量。 制霉菌素1U:为能抑制1ml肉汤培养基中某种酵母菌发育所需的最小剂量。 ①基因工程的发展为发酵工程带来新的活力。 ②新型发酵设备的研制为发酵工程提供先进工具。 ③大型化、连续化、自动化控制技术的应用为发酵工程的发展拓展了新空间。 ④生态型发酵工业的兴起开拓了发酵的新领域。 随着发酵工业的发展,越来越多过去靠化学合成的产品,现已全部或部分借助发酵方法来完成,如化妆品、添加剂等的生产。微生物酶催化生物合成和化学合成相结合,使发酵产物通过化学修饰及化学结构改造进一步为生产更多精细化工产品开拓一个全新的领域。 思考题1.发酵定义?2.发酵工程基本组成部分?3.发酵工业产业化应抓好哪三个环节?4.当前发酵工业面临三大问题是什么?5.我国应该走什么样的发酵工业产业化道路? 第二章 菌种的来源(4学时) 工业化菌种的要求: 能在廉价原料制成的培养基上生长,且大量高效地合成产物;遗传性能要相对稳定;菌种改造的可操作性要强;抗噬菌体及杂菌污染能力强;产生菌及其产物的毒性必须考虑(在分类学上最好与致病菌无关); 发酵条件如温度、pH、溶解氧等易控制 抗生素是次级代谢产物P40,需要生物体进行复杂的代谢,目前发现的生物来源如下:放线菌(链霉素、四环素、红霉素等) 真菌(青霉素、头孢菌素等)一些产芽孢的细菌(多黏菌素、丁胺菌素等) 植物或动物来源(蒜素、番茄素、鱼素等) 菌种分离的一般过程 P14 标本采集→预处理→富集培养→菌种分离(初筛、复筛)→发酵性能鉴定→ 菌种保藏 目的:高效地获取一株高产目的产物的微生物 问题:如何使样品中所含微生物的可能性大?如何在后续的操作中使这种可能性实现? 遵循原则:材料来源越广泛,越有可能获得新的菌种 一般通过以下途径获得菌种: ①向菌种保藏机构索取有关菌株; ②由自然界采集样品,如土壤、水、动植物体等; ③从一些发酵制品中分离目的菌株,如从酱油中分离蛋白酶产生菌,从酒醪中分离淀粉酶或糖化酶的产生菌。 二、微生物材料的标本采集 自然界中微生物极其丰富,土壤是微生物最集中的地方,所以土壤样品往往是采集的首选目标。 土样采集应注意以下问题: A、不同的土壤特点 B、地理和气候条件  C 、微生物的生理特性  D 、极端环境条件下采样分离 A、不同的土壤特点P15 因土壤组成、有机物浓度、pH等条件的不同,微生物的种群分布会非常不同。如菜园和农田常以细菌和放线菌较多(偏碱);果园树根土壤中酵母菌含量较高(偏酸);动植物残骸及腐殖土中霉菌较多;根瘤菌多在豆科植物根系土壤中分离;分解石油的微生物常在油田和石油炼油厂附近的土层中分布最多。 B、地理和气候条件 南方和北方,一年四季。许多工业微生物菌种,如抗生素产生菌,尤其是霉菌、酵母菌,大多从南方。原因是南方温度高、温暖季节长、雨水多、相对湿度高、植被覆盖面广、土壤有机质丰富。冬季温度低气候干燥;春季温度开始回升但雨水较多;夏季天气炎热温度高;秋季采土样最为理想。 采土样的方法:南方,用取样铲,将表层5cm(阳光直射,蒸发量大水分少,而且受紫外线照射)左右的浮土除去,取5~25cm处的土样10~25g,装入事先准备好的塑料袋内扎好。北方土壤干燥,可在10~30cm处取样。给塑料袋编号并记录地点、土壤质地、植被名称、时间及其他环境条件。一般样品取回后应马上分离,以免微生物死亡。 C、微生物的生理特性 筛选高温酶产生菌时,通常到温度较高的南方,或温泉、火山爆发处及北方的堆肥中采集样品; 低温酶产生菌时,南北极地区、冰窑、深海;分离耐压菌则从深海底部采样,如Micrococcus aquivivus水活微球菌,耐600个大气压;分离耐高渗透压酵母菌时,通常到甜果、蜜饯或甘蔗渣堆积处采样。花蜜中分离到一株能耐30%高糖的耐高渗透压的酵母菌。 D、极端环境条件下采样分离 极端微生物的采集。高热、高压、低温、强碱、强酸及高渗透压等 三、标本的预处理 提高菌种分离的效率。表2-2(P16) ●物理方法:加热(55℃,6min;100℃,1h;40℃ 2-6h)、膜过滤法、离心

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