脐带血单核细胞移植治疗慢性脊髓损伤Ⅱ期临床研究.ppt

研究方法 排除标准（ Exclusion Criteria） 明显的肾脏、心血管、肝脏和精神方面的疾病 严重的内科疾病或感染 怀孕或哺乳期妇女 对椎板切除术、甲泼尼龙和/或碳酸锂有禁忌症 正在参与其他研究或在筛选前四周内还在服用其它试验药物 研究方法 分组（n=4，共20人） A组：在脊髓内损伤边缘的4 个点（上下各2个点）注射UCBMC（1 × 105 /μl），每点注射4μl B组：每点注射UCBMC 8μl C组：每点注射UCBMC 16μl D组：C组 + 静脉注射MP1次（ 30mg/kg） E组：D组 + 术后口服碳酸锂片6周（ 750mg/d） 研究方法 细胞准备 脐血单核细胞提取源于美国Stemcyte公司提供的HLA配型人源脐血（HLA ≥ 4:6）。脐血解冻后，Ficoll梯度离心，取“淡黄薄衣（buffy-coat）”层进行细胞分离。细胞用人工血浆制成混悬液，取少量进行台盼兰染料排斥检验检查细胞活性。细胞装入含CIM培养基的洁净密封袋，以室温运送至国内 细胞分离后须在5天内进行移植。移植前，细胞液离心浓缩至每μl含1 × 105活性细胞 研究方法 细胞移植 受试者接受椎板切除术、切开硬脊膜暴露脊髓进行细胞注射。用27号手术针头、以45 °角刺入损伤边缘脊髓背根入区，将细胞混悬液缓慢（1 μl /min）注入背侧髓质，上下各2点，共注射4点。前三组的注射量分别为每点注射4、8和16 μl 。每μl含1 × 105活细胞，细胞总量大约为160、320和640万活细胞。如每组发现有2位或以上受试者因脊髓内注射而出现神经功能丢失，则前一组的剂量为最高安全剂量，用于D和E组 * 研究方法 术后康复训练 手术后2周，所有受试者按昆明步行训练法循序渐进参加为期3个月的强化步行训练康复疗程 Ⅰ级：仅能坐轮椅 Ⅱ级：扶助行车站立，需要一人扶双膝 Ⅲ级：扶助行车独立站立 Ⅳ级：扶助行车，需要一人用绷带拉住双膝行走 Ⅴ级：扶助行车，独立行走 Ⅵ级：扶四角架独立行走 Ⅶ级：拄双拐独立行走 Ⅷ级：拄四点拐独立行走 Ⅸ级：蹒跚步态，独立行走 Ⅹ级：正常行走 截瘫康复训练与评定——昆明步行分级(KLS) 研究方法 临床疗效评价指标 ASIA评分（运动、感觉） ASIA残损分级（AIS） 脊髓损伤步行指数（WISCI） 脊髓损伤独立性评价（SCIM） 视觉疼痛模拟量表 （VAS） 改良Ashworth痉挛分级（MAS） 研究方法 安全性评价 安全性指标为已知的和未知的临床不良发生率、神经学评估基线水平的改变、生命体征、心电图和实验室检查结果 每一组手术治疗完成一周后，评估神经学功能情况，以决定是否继续下一组加大剂量治疗 研究方法 数据分析 所有数据将使用SPSS软件进行分析 主要疗效指标将以运动评分、轻触评分和针刺评分改变的平均值、以及ASIA残损分级表示 结 果 基线资料 年龄：36.9±2.4 岁（18～53岁） 受伤后时间：7.2±1.2年 （2 ～ 20年） E组中有1位患者接受口服安慰剂而非碳酸锂 共3位患者未完成全部步行训练（出现胫骨骨折可 能及膝关节肿胀） 结 果 不良事件 共在19位患者中发生68例不良事件，43例与治疗无关，17例确定与治疗相关，8例可能相关 发生3例严重不良事件（SAE）: 1例伤口延迟愈合，1例脑脊液漏，1例下肢静脉血栓——均通过常规治疗手段获得解决 未出现神经功能损害加重病例 ASIA评分及AIS分级 轻触觉和针刺觉均较治疗前略有提高（1.7、2.6），均无统计学意义（P＞ 0.05） 运动评分无明显提高（1例提高2分，1例提高4分） AIS A →AIS B：2例 （10%） AIS A →AIS C：3例 （15%） 具有统计学意义（ P= 0.038） 结 果 昆明步行分级（KLS） 结 果 昆明步行分级（KLS） 结 果 昆明步行分级（KLS） 术前KLS： Ⅰ级（4例），Ⅱ级（15例）， Ⅳ级（1例） 治疗后KLS： Ⅰ级（1例）， Ⅱ级（2例）， Ⅳ级（17例，85%） 结 果 脊髓损伤步行指数（WISCI） 结 果 脊髓损伤独立性评价（SCIM） 结 果 脊髓损伤独立性评价（SCIM） 结 果 脊髓损伤独立性评价（SCIM） 结 果 疼痛（VAS）与痉挛（MAS）评分 VAS：3例增加，4例降低 （P＞ 0.05） MAS：7例增加，2例降低 （P＞ 0.05） 结 果 MRI-DTI 结 果 MRI-DTI 结 果 MRI-DTI 结 果 在脊髓内损伤边缘每点注射4 ～ 16μl UCBMC（1 × 105 /μl）均较为安全 经治疗，患者的ASIA评分未获得显著提高，但步行能力、生活能力有明显改善 有待Ⅲ期临