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2011年 村饮用水水质微生物 检测技术  微生物指标 菌落总数 令总大肠菌群 耐热大肠菌群  菌落总数 今1方法—平皿计数法 ÷2定义: 菌落总数( standard plate- count bacteria)水 样在营养琼脂上有氧条件下37°C培养48h后,所得 1mL水样所含细菌的总数。 厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其 生理需求,故难以繁殖生长。因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,菌落总数并 不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等 3.主要培养基:营养琼脂 4.主要仪器:培养箱36℃+1°C等  5检验步骤 生活饮用水 1mL水样+15mL45°C左右琼脂—摇匀, 做平行样和空白对照。冷却后,翻转平板 36±1°C培养48h后计数。 今水源水 先制成1:10,1:100等稀释液,再按生 活饮用水的检验步骤进行检验  注意事项 令(1)操作要快而准,包括材料、加样、倒培 养基。 (2)吸液体时液体不能进入吸头 令(3)样品稀释时一定要混匀。 令(4)倒培养基前,瓶口要过火焰 (5)一定要有空白对照。 令(6)培养基温度控制,培养基薄厚  6.菌落计数及报告方法 作平皿菌落计数时,可用眼睛直接观察,必要 时用放大镜检査,以防遗漏。在记下各平皿的菌落 数后,应求出同稀释度的平均菌落数,供下一步计 算时应用。在求同稀释度的平均数时,若其中一个 平皿有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以 无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数 若片状菌落不到平皿的一半,而其余一半中菌落数 分布又很均匀,则可将此平皿计数后乘2以代表全 皿菌落数。然后再求该稀释度的平均菌落数。  7.不同稀释度的选择及报眚方法 ①首选30~300之间进行计算,若只有一个稀释度的平均菌落 数符合此范围时,则将该菌落数乘以稀释倍数报告之(见表 1实例1)。 ②若有两个稀释度,其生长的菌落数均在30~300之间,则视 者之比值来决定,若其比值小于2应报告两者的平均数 (见表1实例2),若大于或等于2则报告其中稀释度较小的 菌落数(见表1实例3、4)。 的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1实例5)。领 ③若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度」 ④若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的 平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1实例6)。  ⑤若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间, 则应以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数 报告之(见表1实例7)。 ⑥若所以稀释度的平板上均无菌落生长,则以未检出 报告之。 ⑦墨所以平妪去菌落寗有x不用多不詁 个平板1cm2中的菌落数,除2求出每平方厘米内平 均菌落数,乘以皿底面积63.6cm2,再乘其稀释倍 数作报告。 ⑧菌落计数的报告:菌落数在100以内时按实有数报 告,大于100时,采用两位有效数字,在两位有效 数字后面的数值,以四舍五入方法计算,为了缩短 数字后面的零数也可用10的指数来表示。  表1稀释度选择及菌落总数报告方式 实例 不同稀释度的平均菌落数 两个稀释度菌落总数 报告方式 菌落数之比( CFU/mL) /(CFU/mL) 16000或1.6×104 38000或3.8×104 2890 27100 10 多不可计 1650 13000 510000或5.1×105 270或27×102 多不可计 0500 31000或3.1×104  二、总大肠菌群 令1方法——多管发酵法(另有滤膜法和酶底物法) 2.定义 总大肠菌群( total coliforms)指一群在37℃C培养 24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革 兰氏阴性无芽孢杆菌。 3.主要培养基:乳糖蛋白胨培养液、伊红美兰培 养基和革兰氏染液。 令4.主要仪器:培养箱、平皿和试管等。