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荧光染料的选择及数据分析
张新梅
From bd biosciences
BD Biosciences
Pharmingen
愁BD
荧光染料的选择
BD Biosciences
Pharmingen
愁BD
竹么是流式细胞仪
在流动的状态中检测颗粒
性物质各种物理及生物特
征的一种仪器;
Fluorescence
LBD
流式细胞仪原理
检测信号
散射光信号
前向散射光信号(FSC)
侧向散射光信号(SSC)
荧光信号
UBD
BD Biosciences
流式细胞仪原理
散射光信号
当颗粒通过聚集的激光束时,激光向各个方
向散射。与激光束方向同轴的称前向角散射
光信号(FSC)。与激光束垂直的称为侧向
角散色光信号(SSC)。
light source
巴BD
流式细胞仪原理
前向角散射光信号(FSC)
FSC反映细胞大小,一般来说,细胞越大
前向角散射光信号越强;
FSC信号与细胞的折射率有关;
可用于表示细胞的凋亡;
区分死/活细胞时,可用于设门;
UBD
BD Biosciences
流式细胞仪原理
侧向角散射光信号(SSC)
·SSC信号主要反映了细胞的内部结构,内部
结构越复杂,SSC信号越强;
UBD
BD Biosciences
流式细胞仪原理
FSC和SSC信号用于检测并显示细胞的物
理学特征
中性粒细胞
o00
oe-ooo
单核细胞
淋巴细胞
200
Forward Scatte
UBD
BD Biosciences
流式细胞仪原理
荧光信号
当荧光抗体或其他染料染色的颗粒通过激光
東时,染料吸收光子跃迁到激发态,返回基
态时,染料释放出能量,大部分以光的形式
释放。这种发射出的光称为荧光
巴BD
BD Biosciences
流式细胞仪原理
侧向款射光及荧光
(55)(FL1—F4)
前向散射光
FS
BD Biosciences
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