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微生物学基础;;1、病毒;病毒的增殖:;2、细菌;芽孢;细菌的外形与大小;细菌的营养类型 ;不种种类微生物代谢类型不同;细菌的分裂生殖;2、放线菌;;三、微生物的菌落:;;细菌的菌落 ;放线菌的菌落特征;酵母菌的菌落特征;霉菌的菌落;四、微生物的营养;;;概念
成分
作用
为什么不可缺少?
常见的生长因子;【典例解析】;微生物学基础;五、培养基 ;根据物理性质分
固体培养基——用于微生物的分离计数
半固体培养基——观察微生物的运动,鉴定菌种
液体培养基——常用于工业生产
根据化学成分分
合成培养基——成分明确,常用于分类,鉴定
天然培养基——成分不明确,常用于工业生产;固体培养基;1.培养基的种类;选择培养基;① 目的要明确
根据所培养的微生物的种类、培养的目的配制P21
② 营养要协调
注意各种营养物质的浓度和比例,最重要为碳源和氮源的比,如:
谷氨酸生产中 C:N=4:1,菌体数↑谷氨酸↓。
C:N=3:1,菌体数↓谷氨酸↑。
③ pH要适宜
细菌 pH6.5~7.5
放线菌 pH7.5~8.5
真菌 pH5.0~6.0;(二)无菌技术;无菌技术;消毒与灭菌;最常用的消毒方法:
1、煮沸消毒法: 100℃煮沸5-6min
2、巴氏消毒法:70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min
3、化学消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源
4、紫外线消毒法;干热灭菌法;高压蒸汽灭菌法:是灭菌效果最好、目前应用最广的灭菌方法。方法是在一密闭蒸锅—高压蒸汽灭菌器内进行的。加热时蒸汽不能外溢,容器内温度随蒸汽压的增加而升高,杀菌力也大为增强。通常 在1.05kg/cm2的压力下,温度达121.3℃,维持15~30分钟,可杀死包括细菌芽胞在内的所有微生物。 此法适用于耐高温和不怕潮湿物品的灭菌。;无菌操作的重要设备--超净工作台;灭菌的方法:
1、灼烧灭菌
2、干热灭菌:160-170 ℃下加热1-2h。
3、高压蒸气灭菌:100kPa、121 ℃下维持15-30min.;1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?;微生物培养的基本操作程序;3、配制培养基;3、配制培养基;(3)溶化 将称好的牛肉膏放入烧杯,加入少量的水,加热。加入蛋白胨和氯化钠,使其溶解。加入琼脂,用玻璃棒不断搅拌(防止琼脂糊底而导致烧杯破裂),加热使其熔化。完全熔化后,补加自来水至100mL。
(4)调节PH
(5)灭菌 将配制好的培养基转移至锥形瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸,用皮筋勒紧,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。将培养皿用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160~170 ℃下灭菌2h。;将培养皿用旧报纸包裹,5~8套一组放入干热灭菌箱内,在160~170 ℃下灭菌2h。;微生物学基础;复习巩固;微生物培养的基本操作程序;(1)将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞。
(2)右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰。;(3)用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖。
(4)等待平板冷却凝固,大约需要5~10min。然后,将平板倒过来放置,使皿盖在下、皿底在上。; 1.培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?;3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?;无菌检查;6、微生物的接种技术;问题讨论; 2.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?;6、微生物的接种技术;6、微生物的接种技术;问题讨论;7、微生物的恒温培养;(二)接种操作是否符合无菌要求
如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合所培养菌种的菌落的特点,则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。
;8、菌种的保存;本课题知识小结:;例2.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是
A.防止杂菌污染 B.消灭杂菌
C.培养基和发酵设备都必须灭菌
D.灭菌必须在接种前;编号;(3)若除去成分②,加入(CH2O),该培养基可用于培养 。
(4)表中营养成分共有 类。
(5)不论何种培养基,在各种成分都溶化后分装前,要进行的是 。
(6)右表中各成分重量确定的原则是 。
(7)若右表
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