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第一章 绪论
1.什么是工业微生物?作为工业微生物应具备哪些特征?
答:工业微生物:对自然环境中的微生物经过改造,用于发酵工业生 产的微生物。
具备特征:(1)菌种要纯
(2)遗传稳定且对诱变剂敏感
(3)成长快,易繁殖
(4)抗杂菌和噬菌体的能力强
(5)生产目的产物的时间短且产量高
(6)目的产物易分离提纯
工业微生物育种的基础是什么?
答:工业微生物育种的基础是遗传和变异。
常用的工业微生物育种技术有哪些?
答:常用技术:(1)自然选育【选择育种】
(2)诱变育种
(3)代谢控制育种
(4)杂交育种
(5)基因工程育种
第二章 微生物育种的遗传基础
1.基因突变的类型有哪些?
答:有碱基突变,染色体畸变
叙述紫外线诱变的原理?
答:原理:紫外线对微生物诱变作用,主要引起DNA的分子结构发 生改变(同链DNA的相邻嘧啶间形成共价结合的胸腺嘧 啶二聚体),从而引起菌体遗传性变异。
基因修复的种类有哪些?
答:种类:(1)光复活修复
(2)切除修复
(3)重组修复
(4)SOS修复
真核微生物基因重组的方式有哪些?
答:方式:(1)有性杂交(2)准性生殖(3)原生质体融合
第三章 出发菌株的分离与筛选
1.什么是富集培养?
答:富集培养:指在目的微生物含量较少时,根据微生物的生理特点, 设计一种选择性培养基,创造有利的生长条件,使目 的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖,数量增加, 由原来自然条件下的劣势种变成人工环境中的优势 种,以利于分离到所需要的菌株。
哪些分离方法能达到“菌落纯”? 哪些分离方法能达到“细胞纯(菌株纯)”?
答:菌落纯:稀释分离法、划线法、组织法
细胞纯:单细胞或单孢子的分离法
分离好氧微生物常用的方法有哪些?
答:(1)稀释涂布法
(2)划线分离法
(3)平皿生化反应分离法
平皿生化反应分离法有哪些?分别用来筛选哪些菌?各自原理如何?
答:(1)透明圈法 原理:在平板培养基中加入溶解性较差的底物,使 培养基混浊,能分解底物的微生物便会在菌 落周围产生透明圈,圈的大小可以放映该菌 株利用底物的能力。
筛选:水解酶产生菌
(2)显色圈法 原理:在底物平板中加入特定的指示剂或显色剂, 根据颜色变化,将目的微生物快速分离出来。
筛选:果胶酶产生菌、分离谷氨酸产生菌、分离解 脂微生物、分离内肽酶产生菌
生长圈法 原理:将待测菌涂布于含高浓度的工程菌并缺少所 需营养物的平板上进行培养,若某菌株能合 成平板所需的营养物,在该菌株的菌落周围 便会形成一个混浊的生长圈。
筛选:氨基酸、核苷酸和维生素产生菌
(4)抑菌圈法 原理:待筛选的菌株能分泌产生某些能抑制工具菌生长的物质, 或能分泌某种酶并将无毒的物质水解成对工具菌有毒的物 质,从而在该菌落周围形成工具菌不能生长的抑菌圈。
筛选 :抗生素产生菌
常用的平板初筛的方法有哪些?
答:方法:(1)形态变异筛选法(2)平皿生化反应筛选法
(3)浓度梯度法(4)染色技术快速筛选法 (5)琼脂块大通量筛选法
初筛和复筛的要求有何不同?
答:初筛是指从大量的菌落中随机挑取进行摇瓶试验并通过检测得到一些较优菌株。 复筛是指将初筛得到的较优菌株再进行多次摇瓶实验验证其效价和传代稳定性,并从 中得到一两个或少数几个最优的菌株。
初筛要求:筛选的菌株尽
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