生化试验之氨基酸与蛋白质代谢试验.ppt

●●● 生化试验 氨基酸和蛋白质代谢试验 微生物的生化反应 概念:用生化的方法来检测细菌对各种基质 的代谢作用及代谢产物,借以鉴别细菌种 类,这种生化试验称为细菌的生化反应试验。 意义:是鉴别细菌的重要依据 糖发酵试验 碳水化合物 甲基红试验 代谢试验 VP试验 生|碳源和氦源 IMVc试 化反应 利用试验 枸櫞酸盐利用试验 蛋白质和氨基 靛基质试验 酸代谢试验 产硫化氢试验 各种酶类试验 抑菌试验 氨基酸和蛋白质代谢试验 :靛基质试验 产H2S试验 尿霉素试验 四:苯丙氨酸脱氨酶试验 五:明胶液化试验 靛基质试验——一实验原理 色氨酸 色氨酸酶 靛基质 (吲哚) 对二甲基氨 基苯甲醛 玫瑰靛基质 (玫瑰吲哚) 、靛基质试验—一实验原理 色氨酸的分解反应: CH-CHN- COOH +NH:+CH- COCOOH H 色氮酸 吲哚 吲哚反应 N(CH,) (CH; 玫瑰吲哚 吲引哚对二甲基氨基苯甲醛 靛基质试——实验原理 某些细菌能分解蛋白胨中 的色氨酸,生成吲哚。吲哚的存 在可用显色反应表现出来。吲哚 与对二甲基氨基苯醛结合,形成 玫瑰吲哚,为红色化合物。 靛基质试验—一实验方法 方法一:将待试纯培养物小量接种 于试验培养基管→36±1℃培养24h时 →取约2m培养液→加入 Kovacs氏试剂 2~3滴→轻摇试管→呈红色为阳性 方法二:先加少量乙醚或二甲苯→ 摇动试管以提取和浓缩靛基质→待其浮 于培养液表面后→再沿试管壁徐缓加入 Kovacs氏试剂数滴→在接触面呈红色, 即为阳性。 靛基质试验—一实验结果 This image depicts the results of negative and positive indole negative Indole positiveIndole tests. The indole test is frequently employed to distinguish Klebsiella(克雷伯菌 属) or Enterobacter(肠杆菌属) bacteria (indole negative) from Escherichia coli (indole positive The presence of E. coli is used by public health officials as an indicator of fecal contamination of food and water supplies 靛基质试验一一应用 检测嗜肺巴氏杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、 伤寒杆菌、志贺氏痢疾杆菌等。 变形杆菌 Escherichia coli Infectious dose: approx. 10-10 Size: 14 x 0.5 microns