第6章-蛋白质的结构和功能.ppt

第六章 蛋白质的结构和功能 主要内容 蛋白质与配体的可逆结合——肌红蛋白与血红蛋白 蛋白质与配体结合的空间互补性——免疫球蛋白 化学能对蛋白质相互作用的影响——肌球蛋白与肌动蛋白 1、肌红蛋白 肌红蛋白（myoglobin，Mb）是哺乳动物细胞主要是肌细胞贮存和分配氧的蛋白质。 肌红蛋白是由一条多肽链和一个辅基血红素构成，相对MW=16700，由153个AA残基。除去血红素的脱辅基肌红蛋白称为珠蛋白。 肌红蛋白的结构 共有8段α-螺旋，占全部序列的75%。整条肽链折叠成紧密球状，疏水侧链大都在分子内部，极性、带电荷的侧链则在分子表面。其分子表面形成一个深的疏水口袋，血红素通过与周围氨基酸残基的次级键以及血红素铁与近端的His形成的配位键而“藏”在洞中 该口袋允许O2进入。 CO也能与血红素结合，CO的毒性是因为它与血红素的亲和力更大，从而阻止O2与血红素的结合。 肌红蛋白的结构 2、辅基血红素 Fe原子被称为原卟啉IX（9）的有机分子固定的，共称血素（Heme），使血液呈红色。Fe有六个配位键，其中四个与卟啉的吡咯环的N原子相连。Fe2+称亚铁血红素，Fe3+为高铁血红素，只有Fe2+的蛋白才能结合氧 3、氧与肌红蛋白的结合 —Fe2+与珠蛋白的93位（F8）His的咪唑基N相连； —当形成氧合肌红蛋白（oxy-myoglobin）时，第6个配位键与氧结合； —当成高铁肌红蛋白时，第6配位键被H2O分子占据； —在氧结合一侧有一E7 His氧结合部位形成空间位阻区 肌红蛋白与氧的结合 CO的毒性作用 Mb多肽微环境的作用 固定血红素基。 保护血红素铁免遭氧化。 为氧分子提供一个合适的结合部位。 氧的结合改变了肌红蛋白的构型 肌红蛋白血红素与氧结合后，铁原子从离卟啉环平面上方0.055nm处，被拉到离卟啉环平面上方0.026nm处。这对Mb生物功能并没有影响，但会影响Hb的性质。 肌红蛋白氧合曲线 肌红蛋白氧合曲线 肌红蛋白氧合曲线 肌红蛋白氧合曲线 2 血红蛋白 血红蛋白的结构 ◇ Hb分子近似球形；M.W.=68 000 ◇ Hb由四个亚基组成（二条α亚基和二条β亚基）； ◇ α亚基（141aa）比β亚基（146aa）短，但都比肌红蛋白链（153aa）短；这主要是因为末端H螺旋比较短； ◇ 4个血红素分别位于四条多肽链的E和F螺旋之间的裂隙处，并暴露于分子表面。 ◇ Hb- α和Hb- β及Mb虽然三级结构相似，但其氨基酸序列却有很大的不同，约只有27个位置是相同的。 血红蛋白4个血红素基分别位于每个多肽链的E和F螺旋之间的裂隙处，并暴露在分子的表面。 氧结合引起的血红蛋白构象变化 氧合作用显著改变血红蛋白的四级结构。 氧结合引起的血红蛋白构象变化 血红素铁0.039nm的微小位移导致血红蛋白构象的改变。 血红蛋白（α2β2），有稳定的四级结构，与氧的亲和力很弱。但当氧与血红蛋白分子中一个亚基的血红素辅基的铁结合后，Fe2+被拉回卟啉环，铁卟啉环由圆顶状变成平面，与配位键连接得His发生位移，并引起该亚基构象改变，一个亚基构象的改变又引起其余亚基的构象相继发生改变，亚基间的次级键被破坏，结果整个分子从紧密的构象变成比较松散的构象，易于与氧结合，使血红蛋白与氧结合的速度大大加快。 血红蛋白上有CO2结合部位，因此，血红蛋白还能运输CO2 氧合血红蛋白和去氧血红蛋白代表不同的构象态。（T态和R态） 氧合导致稳定T态的离子键和盐桥的断裂，血红蛋白的氧结合过程是一协同过程。 Hb的氧结合曲线 血红蛋白是目前了解最清楚的别构蛋白质，血红蛋白的氧合具有正协同效应，即一个O2的结合会增加同一分子中其余空的氧结合部位对O2的亲和力。Hb的氧合曲线呈S形而非双曲线形。每个血红蛋白分子有4个血红素，因此最多只能结合4分子氧，现假定O2与Hb的结合是“全或无”的现象。 Hb的氧结合曲线 ◇ 肺泡中pO2=100torr, YO2=0.97 ◇ 毛细管中pO2=20torr, YO2=0.25 ◇ Hb P50=26torr ◇ Hb 0.97-0.25=0.72 Mb 0.97-0.89=0.08 ◇ 协同效应增加血红蛋白在肌肉中卸O2效率。 血红蛋白四个亚基之间具有正协同效应，氧合曲线是S型曲线 刚开始时，氧的结合要比肌红蛋白对氧的结合慢（在脱氧血红蛋白中，亚基之间的连接比较紧密），这种构象不利于O2的结合，而当第一亚基与氧结合后， 增加了其余亚基对氧的亲和力。 反之，当氧分压降低时，从氧合血红蛋白失去一个氧分子，将引起其余的氧分子更易解离，说明各亚基间存在一种协同效应。 H+、CO2和BPG对血红蛋白结合氧的影响