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质粒及的酶切连接转化及重组子的筛选鉴定一实验目的学习和掌握限制性内切酶的特性掌握对重组质粒进行限制性内切酶酶切的原理和方法掌握利用制备感受态细胞的方法学习和掌握热击法转化的原理和方法掌握互补筛选法的原理学习用试剂盒提取重组质粒的方法复习琼脂糖凝胶电泳的原理及方法二实验原理外源与载体分子的连接即为重组技术这样重新组合的分子叫做重组子重组的分子式在连接酶的作用下有存在的连接缓冲系统中将分别经限制性内切酶酶切酶切酶切酶切的载体分子和外源分子连接连接连接连接起来将重组质粒导入感受态细胞中导入感受态细胞中
质粒DNA及λDNA的酶切、连接、转化及重组子的筛选、鉴定
一、实验目的
1、学习和掌握限制性内切酶的特性
2、掌握对重组质粒进行限制性内切酶酶切的原理和方法
3、掌握利用CaCl2制备感受态细胞的方法
4、学习和掌握热击法转化E.coli的原理和方法
5、掌握α互补筛选法的原理
6、学习用试剂盒提取重组质粒DNA的方法
7、复习琼脂糖凝胶电泳的原理及方法
二、实验原理:
外源DNA与载体分子的连接即为DNA重组技术，这样重新组合的DNA分子叫做重组子。重组的DNA分子式在DNA连接酶的作用下，有Mg2+、ATP存在的连接缓冲系统中，将分别经限制性内切酶酶切酶切酶切酶切的
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