双峰驼T细胞CD3ε和CD4重组蛋白的抗体制备.pdf

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双峰驼T 细胞CD3和CD4 重组蛋白的抗体制备 目录 摘 要 VI SUMMARY VII 缩略词表 IX 第一章 文献综述 1 1 黏膜免疫概述 1 1.1 肠黏膜免疫 1 1.2 支气管黏膜免疫 2 1.3 眼结膜黏膜免疫 3 1.4 鼻黏膜免疫 3 2 T 淋巴细胞 3 2.1 CD4+T 细胞功能 4 2.2 CD8+T 细胞功能 4 3 CD 分子结构及功能 5 3.1 CD3 分子结构及功能 5 3.1.1 CD3 分子信号传导机制 6 3.2 CD4 分子结构及功能 7 3.3 CD8 分子结构及功能 7 4 T 细胞相关疾病 8 4.1 I 型糖尿病 8 4.2 HIV 8 4.3 重症肌无力 8 4.4 乙型肝炎 9 4.5 寄生虫感染 9 I 甘肃农业大学2020 届硕士学位论文 4.6 癌症 10 5 CD 抗体的应用 10 5.1 科学研究中的应用 10 5.2 治疗疾病中的应用 11 第二章 双峰驼CD3重组蛋白的原核表达及抗体制备 12 试验一 CD3重组蛋白的原核表达 12 1 材料 13 1.1 菌种及载体 13 1.2 仪器 13 1.3 主要试剂及配置方法 13 1.3.1 主要试剂 13 1.3.2 试剂配制 13 2 方法 14 2.1 序列同源性分析 14 2.2 CD3生物信息学分析及片段截取 14 2.3 感受态细胞的转化 15 2.4 重组蛋白的诱导表达 15 2.5 重组蛋白SDS的鉴定 15 2.6 重组蛋白表达形式的鉴定 16 3 结果 16 3.1 同源性分析结果 16 3.2 生物信息学分析 16 3.2.1 跨膜区预测结果 17 3.2.2 信号肽预测 17 3.2.3 抗原指数及亲水性预测 18 II 双峰驼T 细胞CD3和CD4 重组蛋白的抗体制备 3.3 CD3重组蛋白的诱导表达 18 3.4 CD3重组蛋白的表达形式鉴定 19 4 讨论 20 试验二 CD3多克隆抗体的制备 21 1 材料 21 1.1 表达菌及实验动物 21 1.2 主要仪器 21 1.3 主要试剂及配制方法 22 1.3.1 主要试剂 22 1.3.2 配制方法 22 2 方法 23 2.1 重组蛋白的纯化 23 2.2 牛血清白蛋白标准曲线绘制 23 2.3 包涵体的复性 23 2.4 CD3多克隆抗体的制备 23 2.5 CD3多克隆抗体血清效价的测定 24 2.6 Western Bloting 检测多克隆抗体特异性 24 3 结果 25 3.1 牛血清白蛋白标准曲线 25 3.2 纯化结果 26 3.3 间接ELISA 对CD3多克隆抗体血清效价测定结果 26 3.4 Western Blot 结果 27 4 讨论 27 第三章 双峰驼CD4 重组蛋白的原核表达及抗体制备 29 试验一 CD4 重组蛋白的原核表达 29 III 甘肃农业大学2020 届硕士学位论文 1 材料 30 1.1 菌种及载体 30 1.2 仪器 30 1.3 主要试剂及配制方法 30 1.3.1 主要试剂 30 1.3.2 试剂配制 30

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