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双峰驼T 细胞CD3和CD4 重组蛋白的抗体制备
目录
摘 要 VI
SUMMARY VII
缩略词表 IX
第一章 文献综述 1
1 黏膜免疫概述 1
1.1 肠黏膜免疫 1
1.2 支气管黏膜免疫 2
1.3 眼结膜黏膜免疫 3
1.4 鼻黏膜免疫 3
2 T 淋巴细胞 3
2.1 CD4+T 细胞功能 4
2.2 CD8+T 细胞功能 4
3 CD 分子结构及功能 5
3.1 CD3 分子结构及功能 5
3.1.1 CD3 分子信号传导机制 6
3.2 CD4 分子结构及功能 7
3.3 CD8 分子结构及功能 7
4 T 细胞相关疾病 8
4.1 I 型糖尿病 8
4.2 HIV 8
4.3 重症肌无力 8
4.4 乙型肝炎 9
4.5 寄生虫感染 9
I
甘肃农业大学2020 届硕士学位论文
4.6 癌症 10
5 CD 抗体的应用 10
5.1 科学研究中的应用 10
5.2 治疗疾病中的应用 11
第二章 双峰驼CD3重组蛋白的原核表达及抗体制备 12
试验一 CD3重组蛋白的原核表达 12
1 材料 13
1.1 菌种及载体 13
1.2 仪器 13
1.3 主要试剂及配置方法 13
1.3.1 主要试剂 13
1.3.2 试剂配制 13
2 方法 14
2.1 序列同源性分析 14
2.2 CD3生物信息学分析及片段截取 14
2.3 感受态细胞的转化 15
2.4 重组蛋白的诱导表达 15
2.5 重组蛋白SDS的鉴定 15
2.6 重组蛋白表达形式的鉴定 16
3 结果 16
3.1 同源性分析结果 16
3.2 生物信息学分析 16
3.2.1 跨膜区预测结果 17
3.2.2 信号肽预测 17
3.2.3 抗原指数及亲水性预测 18
II
双峰驼T 细胞CD3和CD4 重组蛋白的抗体制备
3.3 CD3重组蛋白的诱导表达 18
3.4 CD3重组蛋白的表达形式鉴定 19
4 讨论 20
试验二 CD3多克隆抗体的制备 21
1 材料 21
1.1 表达菌及实验动物 21
1.2 主要仪器 21
1.3 主要试剂及配制方法 22
1.3.1 主要试剂 22
1.3.2 配制方法 22
2 方法 23
2.1 重组蛋白的纯化 23
2.2 牛血清白蛋白标准曲线绘制 23
2.3 包涵体的复性 23
2.4 CD3多克隆抗体的制备 23
2.5 CD3多克隆抗体血清效价的测定 24
2.6 Western Bloting 检测多克隆抗体特异性 24
3 结果 25
3.1 牛血清白蛋白标准曲线 25
3.2 纯化结果 26
3.3 间接ELISA 对CD3多克隆抗体血清效价测定结果 26
3.4 Western Blot 结果 27
4 讨论 27
第三章 双峰驼CD4 重组蛋白的原核表达及抗体制备 29
试验一 CD4 重组蛋白的原核表达 29
III
甘肃农业大学2020 届硕士学位论文
1 材料 30
1.1 菌种及载体 30
1.2 仪器 30
1.3 主要试剂及配制方法 30
1.3.1 主要试剂 30
1.3.2 试剂配制 30
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