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一、名词解释
1、植物组织培养: 植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无
菌培养,并在人工控制的环境条件下,使其发育成完整植株的科学技术
2、胚胎培养: 指对植物的胚、胚胎、胚珠和子房的培养。
3、愈伤组织: 原本指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。在组培
中,则指人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。
4、植物细胞的全能性: 指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组,并具有
发育成完整植株的潜在能力。
5、人工种子 : 指通过组织培养技术,将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均
与合子胚相似的体细胞胚,然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质
中,组成便于播种的类似种子的单位。
6、细胞分化: 一个尚未特化的细胞发育出特征性结构和功能的过程。
7、原生质体培养: 脱去全部细胞壁的细胞叫原生质体,对离体植物的原生质体
进行培养,形成完整植株的培养技术。
8、植物分生组织培养: 是指对植物的分生组织进行离体培养的技术,包括植物
根尖、茎尖等顶端分生组织和形成层组织的培养。其中茎尖培养广泛应用于植
物再生和脱病毒研究。
9、初代培养: 是指在组培过程中,最初建立的外植体无菌培养阶段。即无菌接
种完成后,送入培养室的外植体在适宜的光、温、气等条件下被诱导成无菌短
枝( 或称茎梢 ) 、不定芽 ( 丛生芽 ) 、胚状体或原球茎等中间繁殖体的过程。(将
外植体进行第一次培养。)
10、植物细胞培养: 是指对植物器官或愈伤组织上分离出的单细胞(或小细胞
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团)进行离体培养,形成单细胞无性系或再生植株的技术。
11、外植体: 植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一
切材料。(如器官、组织、细胞、原生质体、种子等)
12、脱分化: 一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的愈
伤组织的现象。
13、再分化: 愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。
二、简答题
1、简述茎尖作为外植体进行初代培养的培养基配方和培养环境特点?
答:
1、简述无菌操作的具体步骤?
答: (1) 在接种 4h 前用甲醛熏蒸接种室;
(2) 在接种前 15-20min ,打开超净工作台的风机以及台上的紫外灯;
(3) 接种员先洗净双手,在缓冲间换好专用实验服,并换穿拖鞋等;
(4) 上工作台后,用酒精棉球擦拭双手,特别是指甲处。然后 70%酒精喷雾降
尘,并擦拭工作台面;
(5) 接种工具蘸 95%酒精,灼烧;
(6) 接种时将瓶口斜着, 使瓶口在酒精灯火焰上转动, 灼烧数秒钟。 接完种后,
将瓶口在火焰上再灼烧数秒钟。
(7) 接种时,接种员双手不能离开工作台,不能说话、走动和咳嗽等;
(8) 接种完毕后要清理干净并用酒精擦工作台。
1) 实验前 20min 将超净工作台的紫外灯打开,进行灭菌。试验时关闭紫外灯,
避免人员被紫外线照射。
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2) 用酒精喷壶或酒精棉将超净工作台消毒,然后实验操作者的手和小臂也用
70%酒精消毒。 实验器具用酒精喷壶消毒之后, 放入装有 95 %酒精的广口瓶
中。
3) 点燃超净工作台上的酒精灯,将广口瓶中的镊子和剪刀等器械取出,在酒精
灯上灼烧,放置在灭菌支架上冷却后使用;镊子和剪刀等器械也可以用灭菌
器灭菌,由于灭菌器温度为 300℃,故器械在灭菌器中灭菌 1-2min ,然后放
在灭菌支架上冷却后使用。
4) 需要接转的培养瓶或新培养瓶均应在酒精灯下方处打开瓶盖,且培养瓶的瓶
口须在酒精灯上灼烧,然后用冷却的无菌器械将材料切割后,植入新培养基
上,快速将瓶盖等封口材料在酒精灯上燎烧,盖上瓶盖等封口材料。记录材
料类型和接种日期,放置培养架上
2、简述茎尖作为外植体进行初代培养的培养基配方和培养环境特点?
3、简述胚胎培养的应用领域?
答 :1)在远缘杂交育种中的应用 : 克服杂种胚不能正常发育
2) 克服珠心胚的干扰 , 提高育种效率
3) 缩短育种周期
4) 测定休眠种子的萌发率
5) 理论研究中的应用
( 一) 克服远缘杂交不亲和性
远缘杂交
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