（优质医学）中国药典检验操作规程.ppt

Title and content layout (Text page) 右手握一次性接种针，把接种针上的菌液涂在培养基一侧，一般作5-8次划线。将环上的多余细菌材料烧掉后，从第1次划线引出第2次划线；再从第2次划线引出第3次划线，如此反复3-4次划线后，即可把整个平板表面划满，注意每一次划线只能与上一次划线重叠，这样就可在最后的1-2次划线上出现多量的单个菌落，以便进行纯培养。 * 「 让PPT设计简单起来！」 Title and content layout (Text page) 2.7.4培养：接种后的平板倒置叠放置于培养箱中，30?35℃培养18?24小时。 2.8培养物的观察 2.8.1需氧菌总数：每天观察菌落的生长情况，如数目多，应及时点计。 2.8.2霉菌和酵母菌总数：每天观察菌落的生长情况，如数目多，应及时点计。 2.8.3大肠埃希菌：每天观察菌落的生长情况。 2.8.4沙门氏菌：菌落为淡红色或无色、透明或半透明、中心有或无黑色。如有疑似菌落则用接种针挑选于三糖铁琼脂培养基高层斜面上进行斜面和高层穿刺接种，培养18?2 4小时，或采用其他适宜方法进一步鉴定。 * 「 让PPT设计简单起来！」 3.数据报告 3.1平皿法：点计平板上生长的所有菌落数，计数并报告。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。点计菌落数后，计算各稀释级供试液的平均菌落数，按菌数报告规则报告菌数。若同稀释级两个平板的菌落数平均值不小于15，则两个平板的菌落数不能相差1 倍或以上。 * 「 让PPT设计简单起来！」 3.2控制菌 3.2.1耐胆盐革兰阴性菌：紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上有菌落生长，则对应培养管为阳性，否则为阴性。根据各培养管检查结果，从表2查l g 或lm l供试品中含有耐胆盐革兰阴性菌的可能菌数。 3.2.2大肠埃希菌：若麦康凯琼脂培养基平板上有菌落生长，应进行分离、纯化及适宜的鉴定试验，确证是否为大肠埃希菌；若麦康凯琼脂培养基平板上没有菌落生长，或虽有菌落生长但鉴定结果为阴性，判供试品未检出大肠埃希菌。 * 「 让PPT设计简单起来！」 3.2.3沙门菌： 若木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基平板上有疑似菌落生长，且三糖铁琼脂培养基的斜面为红色、底层为黄色，或斜面黄色、底层黄色或黑色，应进一步进行适宜的鉴定试验，确证是否为沙门菌。如果平板上没有菌落生长，或虽有菌落生长但鉴定结果为阴性，或三糖铁琼脂培养基的斜面未见红色、底层未见黄色（或斜面黄色、底层未见黄色或黑色，判供试品未检出沙门菌。 * 「 让PPT设计简单起来！」 Title and content layout (Text page) 3.3报告规则：需氧菌总数测定宜选取平均菌落数小于300cfu的稀释级、霉菌和酵母菌总数测定宜选取平均菌落数小于l00cfu的稀释级，作为菌数报告的依据。取最髙的平均菌落数，计算lg 、lmL或10cm2供试品中所含的微生物数，取两位有效数字报告。如各稀释级的平板均无菌落生长，或仅最低稀释级的平板有菌落生长，但平均菌落数小于1 时，以< 1 乘以最低稀释倍数的值报告菌数。 3.4结果判断：10 cfu：可接受的最大菌数为20 100cfu：可接受的最大菌数为200 1000cfu：可接受的最大菌数为2000，依此类推 * 「 让PPT设计简单起来！」 Title and content layout (Text page) 3.5限度标准： 3.5.1不含中药原粉的口服中药制剂： 需氧菌总数 103cfu（≤2000） 102cfu（≤200） 霉菌和酵母菌总数 102cfu（≤200） 101 cfu（≤20） 大肠埃希菌 不得检出 沙门菌（含脏器提取物的）不得检出 3.5.2含中药原粉的口服中药制剂 不含发酵原粉 需氧菌总数 104cfu（≤20000） 5×102cfu（≤1000） 霉菌和酵母菌总数 102cfu（≤200） 102 cfu（≤20） 大肠埃希菌 不得检出 * 「 让PPT设计简单起来！」 Title and content layout (Text page) 沙门菌（含脏器提取物的）不得检出 耐胆盐革兰阴性菌 ＜100 含发酵原粉 需氧菌总数 105cfu（≤200000） 103cfu（≤2000） 霉菌和酵母菌总数 5×100cfu（≤1000） 100 cfu（≤200） 大肠埃希菌 不得检出 沙门菌（含脏器提取物的）不得检出 耐胆盐革兰阴性菌 ＜