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观察植物细胞的质壁分离与复原
一、实验原理
当外界溶液浓度大于细胞液浓度时,根据扩散作用原理,水分会由细胞液中渗出到外界
溶液中,通过渗透作用失水,使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比
细胞壁的伸缩性大,当细胞不断失水时,原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来,也就是逐渐
发生了质壁分离。
反之,外界溶液浓度大于细胞液浓度,则细胞通过渗透作用吸水,整个原生质层就会慢慢地
恢复成原来的状态,使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。
二、实验材料
紫色洋葱的鳞片叶、质量浓度为 30%、50%的蔗糖溶液、蒸馏水,5%的硝酸钾、碳酸
氨溶液,2.5%、10%的氯化钠溶液。
三、实验用具
刀片、镊子、滴管、载玻片、盖玻片、吸水纸、显微镜.
四、实验过程
1.制作临时装片 (选材、取表皮、制片)
2.观察(先低倍镜观察然后高倍镜观察)
3.引流法加入30%的糖液(重复数次)
4.静置、观察
5.引流法加入清水(重复数次)
6.静置、观察
7.同样的步骤用50%蔗糖、蒸馏水、5%的硝酸钾、碳酸氨溶液,2.5% 、10%的氯化钠溶
液重复一遍。
五、实验效果与反思
成熟的植物细胞与高浓度的外界溶液接触时,由于存在半透性膜两侧的浓度差,细胞内
水分外渗而发生质壁分离。因此,当与清水或低浓度的外界溶液接触时,又由于外界水分外
渗而发生质壁分离复原的现象。
该实验成功与否,关键之处有二:一是实验材料(洋葱表皮细胞)的死活。如果所用材
料为死细胞,则注定实验要失败。二是外用溶液浓度的大小。所用溶液浓度不能过高,如用
蔗糖溶液超过 50%,虽然细胞的质壁分离现象显著,但细胞也会因大量失水而死亡,致使
已发生质壁分离的洋葱表皮细胞不能复原,实验失败。
针对上述情况,我对该实验作了如下小改进,以保证实验能够成功完成。
1、改换实验材料 用水棉这一随处可取的材料代替洋葱。制片时只要注意尽量可能
少取水棉 (通常取1——2条),学生觉得比撕洋葱表皮容易得多,制成临时装片或观察效果
明显。
2、对植物细胞死活的鉴定 增加这一步骤,可避免浪费实验时间,保证实验一次性
成功的完成。方法是:在载玻片中央滴一滴清水,取1——2条水棉放于水滴中并展开,盖
上盖玻片,用吸水纸吸去载玻片上多余的水分。先在低倍镜下观察水棉细胞的原有形态(便
於质壁分离及复原时的细胞形态作比较)。再从盖玻片一边滴几滴0.1%的中性红溶液,用吸
水纸从盖玻片对面引流,使水棉细胞与染色剂充分接触被染色,再在低倍镜下观察,可看到
细胞的液泡被染成樱桃红色。原生质层和细胞壁一般不着色,则表明此水棉细胞为活细胞,
可接着做质壁分离及复原实验。如果液泡不着色,原生质层着色,则说明此水棉细胞已失去
生命活力,为死细胞,应丢弃重新取材。
3、改换外用溶液 用1摩尔KNO3溶液取代30%的蔗糖溶液。按教材内容,用30%
蔗糖溶液做此实验,仅质壁分离这一步就需要大约20分钟,中间空闲时间需等待,学生无
事可做,容易引起混乱且课时安排也很紧张。改用1摩尔 KNO3 溶液后,不需等待,课时
安排也很充裕。方法为:在前述活体水棉细胞染色装片的盖玻片一边滴上一滴1摩尔KNO3
溶液,从盖玻片对边引流。重复几次,使 KNO3 溶液与水棉细胞充分接触后,将装片放在
低倍镜下观察,可看到着色的液泡体积逐渐缩小,原生质层与细胞壁之间产生帽状分离,个
别地方形成波浪状分离。随着观察的进行,可找到原生质层与细胞壁完全分离的细胞。接着
在盖玻片一边滴清水,从对边引流,重复几次,洗去高浓度的KNO3 溶液,再观察,又可
看到已经发生质壁分离的水棉细胞重新恢复原状。
上述改进,有利于学生一次性成功地完成此实验,并直接观察到发生渗透作用的细胞的
结构变化。结合讲解,使学生容易明白成熟的植物细胞是一个渗透系统,原生质层具有半透
性膜的特点——选择透过性。此小改进使实验所需时间缩短,且一次成功,效果明显。
六、实验拓展
质壁分离和复原试验还能说明什么?
(1)说明原生质局是选择透过性膜:半透膜只能让液剂(水分子)通过,而不能让溶质分子
(如蔗糖)通过。从自动质壁分离复原现象说明,作为细胞渗透系统的原生质层(包括细胞膜、
液泡膜和这二局之间的细胞质)是选择透过性膜,而不是真正的半透膜,外界溶质分子(如蔗
糖)是可以进入细胞的。
(2)判断细胞的死活:只有活细胞的原生质层才是选择透过性膜,才有质壁分离现象。
若细胞深亡,原生质层结构破
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