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课题1:微生物的实验室培养(课时1)
一:阅读教材 知识梳理
1、培养基
(1):概念:人们按照微生物对 的不同需求,配制出供其 的营养物质。
(2):分类方式
分类标准
培养基类型
配制特点
配置原则
物理性质
固体培养基
加入凝固剂(琼脂)较多
:目的要明确:根据微生物的种类、培养目的等选择原料配置培养基,如:配置自养型的微生物就不用加入有机营养物质。
:营养要协调:注意各种营养物质的浓度和比例。
:pH要适宜:各种微生物适宜生长的pH范围不同。
半固体培养基
加入凝固剂(琼脂)较少
液体培养基
不加入凝固剂
化学组成
合成培养基
由已知成分配制而成,培养基成分明确
天然培养基
由天然成分配制而成,培养基成分不明确
目的用途
鉴别培养基
添加某种指示剂或化学药剂
选择培养基
添加(或缺少)某种化学成分
(3):培养基的化学成分包括 四类营养成分。除此之外,培养基还要满足微生物生长对 、特殊营养物质以及 的要求。例如:培养乳酸杆菌时需在培养基中添加 、培养霉菌时需将培养基PH调至 、培养细菌时需将PH调至 、培养厌氧微生物则需提供 条件。
(4):牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供 、 和 等营养物质。
碳源:如糖类等有机物,构成微生物的结构物质和分泌物,并提供能量。
氮源:如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等,主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
注意:含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源,如氨基酸等。
:选择培养基和鉴别培养基的应用实例
类型
实例
选择培养基
:培养基中加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
:培养基中加入高浓度的食盐用于分离得到金黄色葡萄球菌
:以尿素作为唯一氮源的培养基用于分离分解尿素的细菌
:不添加氮源的培养基用于分离固氮微生物
:培养基放在高温环境中培养能得到耐高温的微生物
鉴别培养基
伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌(菌落呈深紫色并带金属光泽)
2:无菌技术
(1):概念:在培养微生物的操作中,关键是 ,所有防止杂菌污染的方法。
(2):无菌技术包括:
①:对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 ;②:将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行 ;③:为避免周围微生物污染,实验操作应在 旁进行;④:避免已灭菌处理的材料用具与 相接触。
:比较消毒和灭菌
类型
定义
常用方法
应用对象
消毒
使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)
巴氏消毒法
牛奶等不耐高温液体
紫外线
接种室
化学药剂(酒精)
操作者的手
灭菌
使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子)
灼烧灭菌
接种针、接种环
干热灭菌
玻璃器皿和金属用具
高压蒸汽灭菌
培养基
3:培养基的制备
(1)流程:计算→称量→熔化→灭菌→倒平板
(2)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基注意事项(阅读课本)
①:要严格按照配方配置;②:倒平板时要在火焰附近进行;③:不同用具要选用合理的灭菌方法:培养基:高压蒸汽灭菌,培养皿:干热灭菌
【例题1】:不同微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中不正确的是( )
A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素 B.该碳源物质也是该微生物的能源物质
C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D.水是该微生物的营养要素之一
【例题2】:甲、乙、丙是三种微生物,下表I、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖;甲能在I中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,甲、丙都不能。下列说法正确的是( )
粉状硫
10g
K2HPO4
4g
FeS04
0.5g
蔗糖
10g
(NH4)2SO4
4g
H20
100ml
MgS04
9.25g
CaCl2
0.5g
I
+
+
+
+
-
+
+
+
Ⅱ
+
+
+
-
+
+
+
+
Ⅲ
+
+
+
+
+
+
+
+
A.甲、乙、丙都是异养微生物 B.甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物
C.甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物
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