链霉菌操作手册.pdfVIP

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2020-10-09 发布于江苏
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链霉菌操作手册.pdf

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链霉菌室实验操作手册（ 2003 年）第一章培养基抗生素生长因子 3 常用抗生素及其使用浓度 3 LB （Luria-Bertani ）培养基 3 LA 3 基本培养基（ MM ） 3 R5 （1L ）链霉菌原生质体转化时用 4 YEME( 酵母膏 -麦芽膏培养基 ) 1L （液体培养链霉菌） 4 TSBY （1L ）（液体培养链霉菌） 4 MS 培养基 5 2CMY 培养基（用于井岗的接合转移） 5 YMS 培养基（阿维，井岗产孢） 5 YD 培养基 5 生长因子补充物的使用浓度 6 第二章 DNA 基本操作 7 大肠杆菌质粒的抽提 7 酶连反应 7 DNA 片段凝胶回收 8 DNA 纯化 9 E.coil 总 DNA 的提取 9 链霉菌质粒 DNA 的小量提取（还需改进） 10 去磷酸化处理（详见分子克隆实验指南以及 Takara 的 CIAP 使用说明） 10 AT 克隆（详见说明书） 10 Southern Blot 11 第三章 PCR 及相关技术 13 PCR 13 PCR 重组（详见《 PCR 技术实验指南》 p429 重叠延伸技术） 14 PCR 定点诱变（ DpnI 法） 14 第四章基因片段转移技术 15 大肠杆菌 CaCl 2 法制备感受态细胞及 DNA 转化 15 DNA 转化 15 大肠杆菌质粒的快速检测 15 接合转移（详见英文《手册》 249 页） 16 链霉菌原生质体的制备 16 链霉菌原生质体的转化 17 PCR-Targeting 技术中 E.coli 电转化感受态的制备及电转化 17 第五章 RNA 操作技术 19 链霉菌总 RNA 的抽提 19