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贵州大学分子生物学考点总结复习资料
(找贵大生科院老师勾划)
比较原核基因组和真核基因组的不同
答:真核基因组比原核基因组大得多,大肠杆菌基因组约为4×106cp,哺乳类基因组在109cp数量级,比细菌大千倍;大肠杆菌约有4000个基因,人则约有10万个基因。真核生物主要的遗传物质与组蛋白等构成染色质,被包裹在核膜内,核外还有遗传成分(如线粒体DNA),这就增加了基因表达调控的层次核复杂性。
原核生物的基因组基本上室单倍体,而真核基因是二倍体。
细菌多数基因按功能相关成串排列,组成操纵元的基因表达调控的单元,共同开启或关闭,转录出多顺反子(polyelestron)的mRNA;真核生物则是一个结构基因转录生成一条mRNA,即mRNA是单顺反子(monocistron),基本上没有操纵元的结构,而真核细胞的许多活性蛋白是由相同和不同的多肽链形成的亚基构成的,这就涉及到多个基因协调表达的问题,真核生物基因协调表达要比原核生物复杂得多。
原核基因组的大部分序列都为基因编码,而核酸杂交等实验表明:哺乳类基因组的仅约10%的序列是编码蛋白或rRNA等的基因,其余约90%的序列功能至今还不清楚。
原核生物的基因为蛋白质编码的序列绝大多数是续的,而真核生物为蛋白质编码的基因绝大多数是不连续的。即有外显子(exon)和内含子(intron),在转录后经剪接(splicing)去除内含子,才能翻译获得完整的蛋白质,这就增加了基因表达调控的环节。
原核基因组中除rRNA、tRNA基因有多个拷贝,重复序列不多。哺乳动物基因组中存在大量重复序列(repetitive sequences)。(1)高度重复序列(high repetitive sequences)这类序列一般较短,长10-300bp,在哺乳类基因组中重复106次左右,占基因组DNA序列总量的10-60%,人的基因组中这类序列约占20%,功能还不明了。(2)中度重复序列(moderate repetitive sequences)这类序列多数长100-500bp,重复10-105次,占基因组10-40%。例如哺乳类中含量最多的一种称为Alu的序列,长约300bp,在哺乳类不同种属间相似,在基因组中重复3-5×105 次,在人的基因组中约占7%,功能也还不很清楚。在人的基因组中18S/28SrRNA基因重复280次,5SrRNA基因重复2000次,tRNA基因重复1300次,5种组蛋白的基因串列基本上不重复,占哺乳类基因组的50-80%,在人基因组中约占65%。绝大多数真核生物为蛋白质编码的基因在单倍体基因组中都不重复,是单拷贝的基因。
有一个被人为是mRNA的核苷酸序列,长300个碱基,你怎么样才能:
证明此RNA是mRNA,而不是tRNA或rRNA。
确定它是真核还是原核mRNA。
答:(1)此序列长期共300个碱基,而tRNA一般长73-93个碱基,此序列太长,不可能是tRNA;若它是rRNA,它的序列组成中该有假尿嘧啶和5-甲基胞嘧啶等。同时应形成发夹环的反向重复序列。如果是mRNA,则应有AUG起始码子、一段相应的氨基酸密码子和一个相应的终止密码子构成的读码框。
(2)所有真核mRNA在5, 端都含有7-甲基鸟苷,而且大多数还在3,端有一个长的polyA尾巴。这些都是原核mRNA所不具有的,但原核mRNA靠近5,端有一个富含嘌呤碱基的核糖体结合序列。
3.顺式作用元件 操纵元中的启动子、操纵子位于紧邻结构基因群的上游,终止子在结构基因群之后,它们都在结构基因的附近,只能对同一条DNA链上的基因表达起调控作用,称为顺式作用,启动子、操纵子和终止子就叫顺式作用元件。
4. 核酶 具有催化活性的RNA
5.启动子 启动子是DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合的部位,也就是使转录开始的部位。在RNA合成开始位点的上游大约10bp和35bp处有两个共同的顺序,称为-10和-35序列,这两个序列的共同顺序如下:-35区“AATGTGTGGAAT”,-10区“TTGACATATATT”。大多数启动子均有共同顺序(consensus sequence)只有少数几个核苷酸的差别。
6.反式调控因子
操纵元中,调控基因可以在结构基因群附近、也可远离结构基因,它是通过其基因产物—调控蛋白来发挥作用的,因而调控基因不仅能对同一条DNA链上的结构基因起表达作用,而且能对不在同一条DNA链上的结构基因起作用,称为反式作用,调控基因叫反式作用元件,其编码产生的调控蛋白称为反式调控因子。
7.反义RNA
反义RNA指与mRNA互补的RNA分子, 也包括与其它RNA互补的RNA分子。由于 核糖体不能翻译双链的RNA,所以反义RNA与mRNA特异性的互补结合, 即抑制了该mRNA的 翻译。通过
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