赤霉素对α- 淀粉酶的诱导作用(by wjl).pptVIP

赤霉素对α- 淀粉酶的诱导作用(by wjl) 实验前对下列物品灭菌 干净培养皿20个(按10组计，每组同学2个培养皿，一个实验组，一个对照组)用报纸包好； 蒸馏水2瓶(250ml大三角瓶，每瓶盛有150mL蒸馏水)，用锡箔纸或报纸封口； 大三角瓶2个，分别装有100mL蒸馏水和100mL 200ppm的赤霉素溶液（20mg赤霉素溶于少量酒精中，再溶于100ml蒸馏水），且瓶内浸有d≈1cm的滤纸小圆片。 I 赤霉素对α- 淀粉酶的诱导作用 实验原理 禾谷类种子的糊粉层是一种分泌组织，它围绕着种子的胚乳。当种子吸水后，糊粉层细胞受来自胚的赤霉素的诱导，合成或激活许多水解酶类，促使胚乳或基质中的淀粉水解。如果把胚去掉，则去胚种子不能或很少产生淀粉酶，所以淀粉的水解不能发生；如果把外源的赤霉素施加到去胚的种子上，则能诱导淀粉酶的产生，促进淀粉的水解。 α- 淀粉酶（水解酶类） 糊粉层细胞（分泌组织） 产生赤霉素 胚乳或基质中的淀粉水解 萌发种子的胚 外源赤霉素 去胚的种子 A: 玉米颖果外型 B: 玉米颖果纵切面 种皮 胚 胚乳 子叶 胚芽 胚轴 胚根 糊粉层 实验材料 小麦种子 实验设备 ⑴培养血; ⑵刀片; ⑶镊子; ⑷滤纸; ⑸酒精灯。 实验试剂 ⑴赤霉素; ⑵安替福民（20ml安替福民+80ml水）; ⑶可溶性淀粉; ⑷琼脂; ⑸I-KI溶液（2g 碘化钾 + 1g 碘 +300ml水）。 实验步骤 培养基的制备 取预先剪碎的琼脂0.4g,放入盛有30mL蒸馏水的烧杯，加热搅拌，待琼脂完全溶解,加入0.3g淀粉，继续加热煮沸，直到溶液透明为止。在燃烧的酒精灯旁，趁热将溶液倒入预先灭菌的培养皿中，并立即盖好(2个培养皿：1个作对照，1个用于GA诱导α- 淀粉酶),待凝固后备用。如果10组同学一块配培养基，则需要8g琼脂+6g淀粉+600ml水。 放置滤纸圆片 将沾有200ppm的无菌赤霉素溶液的滤纸圆片，放在培养基表面上，每个培养基上可放4片（d≈1cm），另将沾有无菌水的滤纸圆片同样贴于培养基上作对照用。以上操作保证无菌操作。 种子的去胚，消毒和培养 选取10-20粒大小均一的小麦种子，用刀片横切两半，留无胚部分用20%安替福民消毒15-30分钟，用无菌水冲洗6次，放置在培养基的滤纸圆片上（1/1），盖上盖，于室温培养48 ~72小时。 现象观察 培养完毕后，用镊子小心除去小麦种子和滤纸圆片，用碘液染色。观察淀粉的水解情况，并分析实验现象。 注意事项 赤霉素对α- 淀粉酶的诱导作用实验应该注意： 1. 无菌操作 2. 将小麦的胚去彻底 3. 淀粉最好逐步加入，不要一次性倒入，防止液体溢出。 4.碘液染色时，每块滤纸片下面只滴一滴，最好滴在种子放置的位置。