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项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 知识点一 底物浓度和酶浓度的影响 一、酶促反应基本知识 酶促反应动力学是研究各种因素对酶促反应速度的影响及其反应的规律。 影响酶促反应的因素有 酶浓度 底物浓度 pH 激活剂和 抑制剂等 温度 1、酶促反应初速度的概念 斜率=[P]/ t = V(初速度) [P] t 2、酶活力 检测酶含量及存在,很难直接用酶的“量”(质量、体积、浓度)来表示,而常用酶催化某一特定反应的能力来表示酶量,即用酶的活力表示。 酶催化一定化学反应的能力称酶活力,酶活力通常以最适条件下酶所催化的化学反应的速度来确定。 酶活力的表示方法 活力单位(active unit) 习惯单位(U): 底物(或产物)变化量 / 单位时间 国际单位(IU): 1μmoL变化量 / 分钟 Katal(Kat):1moL变化量 / 秒 比活力= 总活力单位 总蛋白mg数 = U(或IU) mg蛋白 量度酶催化能力大小 转换系数(Kcat) 底物( μ moL)/ 秒·每个酶分子 量度酶纯度 比活力(specific activity) 量度转换效率 3.酶活力测定方法 终点法: 酶反应进行到一定时间后终止其反应,再用化学或物理方法测定产物或反应物量的变化。 动力学法:连续测定反应过程中产物\底物或辅酶的变化量,直接测定出酶反应的初速度。 注意: 酶促反应速度指初速度。 在研究某一因素时,应保持体系中的其它因素不变。 (一)底物浓度的影响 二、浓度的影响 1.当[S]较低时,增加底物浓度,反应速度随[S]的增加而增加,两者呈正比关系。 2.随着[S]浓度进一步增加,反应速度不再呈正比例增加,增加的幅度逐渐变小。 3.当[S]增加到一定程度时,继续增加[S],反应速度不再增加,达到最大。 (1)米-曼氏方程式 Vmax为最大反应速度 [S]为底物浓度, Km为米氏常数 V是在不同[S]时的反应速度,均为初速度,即[S]>>[E],不考虑[S]浓度的降低和[P]浓度增加的影响。 ————* 酶促反应速度与底物浓度关系的数学方程式 Vmax[S] Km+[S] V = ? Km值等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。 ?Km是酶的特征性常数。 ?Km表示酶对底物亲和力的大小。 多底物反应的酶对不同的底物,有不同的 Km值。 (2)Km值的定义与意义 (二)酶浓度的影响 当反应系统中底物的浓度足够大时,酶促反应速度与酶浓度成正比,即ν=k[E]。 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促反应速率的因素 项目二 影响酶促
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