酶制剂生产技术 第二节 菌种选育保藏与培养基配制 菌种选育保藏与培养基配制.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * 按用途不同分为： 1．基础培养基:含有一般细菌生长繁殖需要的基本的营养物质。如牛肉膏蛋白胨培养基。 2．营养培养基（加富培养基）:在基础培养基中加入某些特殊营养物质，如血液、血清、酵母浸膏或生长因子等。用以培养对营养要求高的微生物，如培养百日咳杆菌需要含有血液的培养基。在研究致病微生物时常采用加富培养基。 3．鉴别培养基:是一类含有某种特定化合物或试剂的培养基。主要用于不同类型微生物的快速鉴定，如糖发酵管。 4．选择培养基:利用微生物对某种或某些化学物质的敏感性不同，在培养基中加入这类物质，抑制不需要的微生物生长，而利于所需分离的微生物生长，从而达到分离或鉴别某种微生物的目的，如分离真菌的马丁氏培养基。 ☆ 选择培养基 加入青霉素的培养基： 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基： 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基： 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基： 分离自养型微生物 加入青霉素等抗生素的培养基： 分离导入目的基因的受体细胞 加入氨基嘌呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基： 分离杂交瘤细胞 （四）、培养基配制的一般程序 称量：按照配方正确称取各种原料放于搪瓷杯中。 溶化：在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解。 调pH值：用1N NaOH或1N HCl调pH，用pH试纸对照。 加琼脂溶化：加热过程中要不断搅拌，可适当补水。 过滤 分装：注意不要污染棉塞。 包扎成捆，挂上标签（必须用铅笔写），注明何种培养基。 灭菌 摆斜面 检查：培养基灭菌后必须在370C下恒温培养24h，确定无菌生长，方可使用。 按培养基配方称量 加水加热熔化 调节pH值 过滤 分装包装 灭菌 检查灭菌彻底与否 常见培养基类型（了解） 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（用于分离和培养细菌，是一种天然培养基）属基础培养基 营养琼脂培养基是天然培养基，属基础培养基 马铃薯（或豆芽汁）蔗糖（或葡萄糖）琼脂培养基（用于分离和培养真菌之用，是一种半合成培养基）选择性合成培养基。 淀粉琼脂培养基（高氏一号Gause′1），用于分离和培养放线菌，是一种合成培养基。用于放线菌培养。选择性合成培养基。 伊红美兰培养基（EMB培养基）用于分离和鉴别大肠菌群。 用于分离、培养土壤真菌的马丁氏培养基：属选择性合成培养基。 乳糖胆盐发酵管用于分离和培养大肠菌群属选择性培养基 牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养） 高氏1号培养基(用于放线菌培养) 马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌） 马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养) 察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养) 葡萄糖蛋白胨水培养基(用于甲基红试验) 蛋白胨水培养基(用于吲哚试验) 糖发酵培养基(用于细菌糖发酵试验) 乳酸菌培养基(用于乳酸发酵) 酒精发酵培养基(用于酒精发酵) 乳糖蛋白胨半固体培养基(用于水体中大肠菌群测定) 乳糖蛋白胨培养液(用于多管发酵法检测水体中大肠菌群) 三倍浓乳糖蛋白胨培养液(用于水体中大肠菌群测定) 伊红美蓝培养基(EMB培养基)(用于水体中大肠菌群测定和细菌转导) 加倍肉汤培养基(用于细菌转导) 课堂总结 培养基的配制 菌种保藏与活化 菌种选育 作 业 简介菌种选育的流程 1 菌种保藏的方法有哪些 2 培养基的分类 3 培养基的配制过程 4 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 酶制剂生产技术模块二 酶的发酵生产 生物化工学院 兰欣 引 入 上节课我们学习了酶的生产方法包括提取分离法、化学合成法和生物合成法，生物合成法适合大规模的工业生产，包括微生物发酵生产、动物细胞和植物细胞发酵产酶。本节课我们进入发酵工艺的第一步-菌种的选育,保藏与活化以及培养基的配制。 学习情境五 菌种选育保藏与培养基配制 工作任务 （一）菌种的选育 工作任务 （二）菌种的保藏与活化 工作任务 （三）培养基配制 工作任务 （一）菌种的选育 例如，青霉素的发酵生产，在投产之初只有40U·mL-1，得到黄色晶体，青霉素纯度很低，价比黄金；而现在采用新型菌种可以达到60000U·mL-1以上，得到晶体为纯白色，青霉素纯度高达95%以上，成本不到0.1元。 青霉素发酵生产的这种质的飞跃，生产所用菌种在其中起了关键作用。 菌种选育有何意义？ 拥有良好生产菌种是前提，菌种质量好坏直接 影响了