岛津紫外可见近红外分光光度计试验.ppt

UV-2550 的光学系统 岛津紫外、可见、近红外 分光光度计 新人培训资料 岛津国际贸易（上海）有限公司 小型分析仪器部 市场部 第一篇 紫外、可见、近红外分光光 度计的原理及应用领域 第二篇 岛津 UV 的历史与地位 第三篇 岛津 UV 光学系统的特点 第四篇 岛津 UV 操作软件的特点 目录 第一篇 紫外、可见、近红外分光光度计 的原理及应用领域 1852 年，比尔（ Beer ）参考了布给尔（ Bouguer ） 1729 年和朗伯（ Lambert ）在 1760 年所发表的文 章，提出了分光光度的基本定律，即液层厚度相等 时，颜色的强度与呈色溶液的浓度成比例，从而奠 定了分光光度法的理论基础，这就是著名的比尔朗 伯定律。 1854 年，杜包斯克（ Duboscq ）和奈斯勒 （ Nessler ）等人将此理论应用于定量分析化学领域， 并且设计了第一台比色计。到 1918 年，美国国家标 准局制成了第一台紫外可见分光光度计。此后，紫 外可见分光光度计经不断改进，又出现自动记录、 自动打印、数字显示、微机控制等各种类型的仪器， 使光度法的灵敏度和准确度也不断 提高，其应用范 围也不断扩大。 原理：物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和 原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量， 相 应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结 果。由于各种物质具有各自不同的分子 、原子和不 同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会 相同，因此，每种物质就有其 特有的、固定的吸收 光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的 吸光度的高低判别或 测 定该物质的含量，这就是分 光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是 根据物质的吸 收光谱研究物质的成分、结构和物质 间相互作用的有效手段。紫外可见分光光度法的定 量分析基础是朗伯 - 比尔（ Lambert-Beer ）定律。 即物质在一定浓度 的吸光度与它的吸收介质的厚度 呈正比。 应用 1 检定物质：根据吸收光谱图上的一些特征吸收，特 别是最大吸收波长虽 ax 和摩尔吸收系数是检定物质 的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的 应用。在国内外的药典中，已将众多的药物紫外吸 收光谱的最大吸收波长和吸收系数载入其中，为药 物分析提供了很好的手段。 2 与标准物及标准图谱对照 ：将分析样品和标准样 品以相同浓度配制在同一溶剂中，在同一条件下分 别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质，则 两者的光谱图应完全一致。如果没有标样，也可以 和现成的标 准谱图对照进行比较。这种方法要求仪 器准确，精密度高，且测定条件要相同。 3 比较最大吸收波长吸收系数的一致性 4 纯度检验 5 推测化合物的分子结构 6 氢键强度的测定 7 络合物组成及稳定常数的测定 8 反应动力学研究 9 在有机分析中的应用 有机分析是一门研究有机化合物的分离、鉴别及组 成结构测定的科学，它是在有机化学和分析化学的 基础上发展起来的综合性学科。 电磁波的区分 UV/VIS/NIR 光照射到物质上 入射光 I 0 透射光 I 1 光程长 自光源 透射率 T = I 0 I 1 检测器 LAMBERT-BEER 定律 此处 T : 透射率 e : 摩尔消光系数 l : 光程长 C : 浓度 吸收 A = log = e C l 1 T 紫外 - 可见分光光度计的结构 紫外 - 可见分光光度计的基本结构是由五 个部分组成： ?光源 ?单色器 ?吸收池 ?检测器 ?数据系统。 紫外 - 可见分光光度计的结构 （一）光源 对光源的基本要求是应在仪器操作所需的光 谱区域内能够发射连续辐射，有足够的辐射强度 和良好的稳定性，而且辐射能量随波长的变化应 尽可能小。 热辐射光源用于可见光区，如钨丝灯和卤钨 灯，钨灯和碘钨灯可使用的范围在 340 － 2500nm ； 气体放电光源用于紫外光区，如氘灯。它可在 160 － 375 nm 范围内产生连续光源。氘灯的灯管 内充有氢的同位素氘，它是紫外光区应用最广泛 的一种光源。 紫外 - 可见分光光度计 （二）单色器 单色器是能从光源辐射的复合光中分出单色 光的光学装置，其主要功能：产生光谱纯度高的 波长且波长在紫外可见区域内任意可调。 单色器一般由入射狭缝、准光器（透镜或凹 面反射镜使入射光成平行光）、色散元件、聚焦 元件和出射狭缝等几部分组成。其核心部分是色 散元件，起分光的作用。单色器的性能直接影响 入射光的单色性，从而也影响到测定的灵敏度度、 选择性及校准曲线的线性关系等。 光栅是利用光的衍射与干涉作用制成的，它可用于紫 外、可见及红外光域，而且在整个波长区具有良好的、 几乎均匀一致的分辨能力。它具有色散波长范围宽、分 辨本领高、成本低、便于保存和易于