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上海理工大学医疗器械与食品学院 - OLYMPUS- I X7 1 倒置相差荧光显微镜使用说明 -------------------------------------------------------------------------- 作者 : _____________ -------------------------------------------------------------------------- 日期 : _____________ OLYMPUS IX71 倒置相差荧光显微镜使用说明 一、明场方式的使用说明 打开明场卤素灯控制器（ TH4 ）电源，“ I ”为打开，“ o”为关闭。 TH4电源开关 TH4 光强调节旋钮 调节 TH4 上的光强调节旋钮，获得合适的光强度。 选择合适的物镜并将聚光镜上的调节环至 BF 或空档位置。 调节调焦旋钮，获得清楚的明场图像。 6）进行拍照时，要将光路切换到目镜和软件里都可看的位置。 光路切换旋钮 当前位置为完全目镜位置， 光 100%到目镜，软件下看不 到； 若将旋钮逆时针旋转至最下 方时，此时目镜下和软件里 都可以看到，拍照时要将光 路切换到此位置。 二、相差方式的使用说明 选择合适的物镜和聚光镜中的相差环。 聚光镜（ 5 孔位） 1 号孔位相差环 PHL 2 号孔位相差环 PH1 3 号孔位相差环 PH2 在聚光镜右侧旋转调 节相差环，白点处的 显示数字即代表相对 应的相差环已放入光 路 4X 物镜用 PHL 10X、 20X 物镜用 PH1 40X 物镜用 PH2 调节调焦旋钮，获得清楚的相差图像。 20X 、40X 的物镜上有矫正环，根据不同的培养容器需要调节矫正环，在聚焦到相对最清楚后调节矫正环至图像最清晰。 *观察相差时，要使用与相差物镜放大倍数相匹配的相差环板。 三、荧光方式的使用说明 打开汞灯光源控制器 U-RFL-T 的电源（开关在控制器前面板右下方） “I ”为打开，“ o”为关闭； 2s 后“ BURNER ON”指示灯点亮为绿色，荧光光源完全打开。 显示汞灯灯泡已用小时数 “BURNER ON”指示灯 汞灯光源控制器电源开关 注意：汞灯光源不要频繁开关，打开后至少使用半小时以上，关 闭后至少等待半小时再打开。 2）调节荧光滤色块转盘到合适的位置进行荧光观察。观察之前确保荧光滤 色块转盘上的光闸 shutter 处于打开位置（“ o”为打开，反之为关闭）。 光闸 shutte r 孔位荧光滤色块转盘  、调节荧光滤色镜转盘时，需 要确认荧光滤色镜和标本所需的 激发波长一致 UW—蓝色荧光（ DAPI、Hochest 等） BWA—绿色荧光（ AlexFluo 488、GFP等） GW—红色荧光（ TRITC、 DsRed 等） Ⅱ 、为了防止标本的淬灭，观察或成像后请及时关闭荧光滤色镜转盘上的荧光光闸 （SHUTTER）。 四、 DP2-BSW软件使用 1）单张实时图像预览及图像采集 左侧为软件预览及采集界面，在该界面下可以调节单张采集时的各种参数： 实时预览 图像采集 Movie 模式采集 曝光选项，分为手动曝光 / 自动曝光和超级荧光模式 曝光区域选择，有 0.1%/1%/30%和 Full Image 四种 灵敏度选择，一般选择 ISO200 曝光补偿 , 一般选择“ 0” 预览分辨率选择，最高可选 1360X1024 采集分辨率选择，分辨率越高，图像越清晰，相应拍摄时间也略有会增加 图像对比度调节 2）图像添加标尺及标尺保存 、拍照前在软件中选择正确的物镜倍率。 Ⅱ、在 View 菜单下选择 Scale Bar 选项，标尺即会在图片上显示出 来。 Ⅲ、拍照以后如果想将标尺保存在图片中，则在 Image 菜单下选择 Burn In Info 选项，然后保存图片。 3）白平衡和黑平衡 Ⅰ、在预览界面下可使用黑白平衡功能，根据标本类型不同，黑白平衡 功能之一分别可用（明场观察时白平衡可用，荧光观察时黑平衡功能可 用）。 黑平衡 Ⅱ、点击黑（白）平衡按钮，然后在预览图片上选取合适的背景地方划 一块区域，软件会自动完成黑（白）平衡。 Ⅲ、执行完黑（白）平衡以后，若要恢复图像原来的色调，可通过点击 “acquisition setting ”找到” Camera”然后将其下拉菜单里的 “color ”的 RGB值恢复初始状态即可。 ----------THE END, THERE IS NO TXT FOLLOWING.------------