保健食品中五味子醇甲、五味子醇甲素和乙素的测定.pdfVIP

十二、保健食品中五味子醇甲、五味子甲素和乙素的测定 1 范围 本方法规定了保健食品中五味子醇甲、五味子甲素和乙素的高效液相色谱测定方法。 本方法适用于以北五味子为主要原料生产的保健食品中五味子醇甲、五味子甲素和乙素 含量的测定。 2 原理 将试样中的五味子醇甲、五味子甲素和乙素经甲醇提取后，使用等度洗脱反相高效液相 色谱进行分离，二极管阵列检测器检测，根据色谱峰的保留时间和紫外光谱图定性，外标法 定量。 3 试剂和材料 注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1 甲醇（CH OH ）：色谱纯。 3 3.1.2 甲醇（CH OH ）。 3 3.2 标准品 五味子醇甲、五味子甲素和乙素标准样品的分子式、相对分子量、CAS 登录号见表1， 纯度≥98% ，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。 表1 五味子醇甲、五味子甲素和乙素标准样品的中文名称、英文名称、CAS 登录号、分子 式相对分子量 中文名称 英文名称 CAS 登录号 分子式 相对分子量 五味子醇甲 Schisandrin 7432-28-2 C24H32O7 432.51 五味子甲素 Deoxyschisandrin 61281-38-7 C24H32O6 416.51 五味子乙素 Schisandrin B 61281-37-6 C23H28O6 400.46 3.3 标准溶液配制 3.3.1 五味子醇甲、五味子甲素和乙素混合标准储备液：分别准确称取五味子醇甲、五味子 甲素和乙素标准样品（3.2 ）20mg （精确至0.01mg ），用甲醇溶解，并转移至10mL 容量瓶 中，定容至刻度，溶液浓度分别为2mg/mL 。 3.3.2 五味子醇甲、五味子甲素和乙素混合标准系列工作液：分别准确吸取不同体积的混合 标准储备液（3.3.1 ），用甲醇将其稀释成含量分别为0.020mg/mL 、0.050mg/mL 、0.20mg/mL 、 0.50mg/mL 、1.0mg/mL 的标准系列工作液。 4 仪器和设备 51 4.1 高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器。 4.2 超声波清洗器。 4.3 分析天平：感量分别为0.01mg 和0.001g 。 5 分析步骤 5.1 试样制备 准确称取粉碎后样品适量（相当于含五味子总量30mg ，精确至0.001g ），置20mL 容 量瓶中，加入甲醇（3.1.2 ）约18mL，超声提取20min ，取出，静置待冷，加甲醇至刻度。 试样溶液过0.45μm 有机系滤膜，滤液进行液相色谱分析。 5.2 仪器参考条件 5.2.1 色谱柱：C18 柱，250mm×4.6mm，5μm，或同等性能色谱柱。 5.2.2 检测波长：254nm 。 5.2.3 流动相：甲醇 （3.1.1 ）+水，（77+23 ，v/v ）。 5.2.4 流速：1.0mL/min。 5.2.5 柱温：35℃。 5.2.6 进样量：10μL。 5.3 标准曲线的制作 将标准系列工作液（3.3.2 ）分别按液相色谱参考条件（5.2 ）进行测定，以标准工作液 的浓度为横坐标，以色谱峰的峰面积为纵坐标，绘制五味子醇甲、五味子甲素和乙素的标准 曲线。 5.4 试样溶液的测定 将试样溶液（5.1 ）按液相色谱参考条件（5.2 ）进行测定，以保留时间和紫外光谱图定 性，用相应样品溶液五味子醇甲、五味子甲素和乙素的色谱峰面积，根据标准曲线得到待测 液中五味子醇甲、五味子甲素和乙素的浓度，平行测定次数不少于两次。 五味子醇甲、五味子甲素和乙素的标准液相色谱图参见附录A 的图A.1 。 6 结果计算 试样中五味子醇甲、五味子甲素和乙素的含量按下式计算： C V 100 X 