保健食品中左旋肉碱的测定.pdfVIP

四、保健食品中左旋肉碱的测定 1 范围 本方法规定了保健食品中左旋肉碱的液相色谱测定方法。 本方法适用于以左旋肉碱为主要原料的保健食品中肉碱的含量测定。 2 原理 试样中的左旋肉碱以0.50mmol/L 的盐酸溶液经超声提取，反相色谱分离，以保留时间 定性，外标法定量。 3 试剂和材料 注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682 规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1 磷酸氢二钾（K HPO ）。 2 4 3.1.2 辛烷磺酸钠（C H NaO S）。 8 17 3 3.1.3 盐酸（HCl ）：含量：36%~38% 。 3.1.4 磷酸（H PO ）。 3 4 3.1.5 硅藻土（SiO ）：粒径范围：0.2-0.8mm 。 2 3.1.6 乙腈（CH CN ）：色谱纯。 3 3.2 标准品 左旋肉碱标准样品的分子式、相对分子量、CAS 登录号见表 1，纯度≥98% ，或经国家 认证并授予标准物质证书的标准物质。 表1 左旋肉碱标准样品的中文名称、英文名称、CAS 登录号、分子式、相对分子量 中文名称 英文名称 CAS 登录号 分子式 相对分子量 左旋肉碱 L-Carnitine 541- 15- 1 C H NO 161.20 7 15 3 3.3 标准溶液配制 3.3.1 左旋肉碱标准储备液：称取25mg （准确至0.01mg ）左旋肉碱标准品（3.2 ）于25mL 容量瓶中，用盐酸溶液（3.4 ）溶解并定容至刻度，摇匀。此溶液浓度为1.0mg/mL。 3.3.2 左旋肉碱标准系列工作液：分别准确吸取左旋肉碱标准储备液（3.3.1 ）0.50mL 、1.0mL、 2.0mL 、3.0mL 、4.0mL 、5.0mL 于5mL 容量瓶中，用盐酸溶液（3.4 ）稀释至刻度，得浓度 分别为0.10mg/mL 、0.20mg/mL 、0.40mg/mL 、0.60mg/mL 、0.80mg/mL 、1.00mg/mL 的标准 系列工作液。临用时配制。 3.4 盐酸溶液（0.5mmol/L ）：准确吸取4.2mL 盐酸（3.1.3 ），用水定容至100mL。摇匀后， 再吸取上述溶液1.0mL，用水定容至1L。 3.5 缓冲盐溶液：分别准确称取3.4g 磷酸氢二钾（3.1.1 ）和0.4325g 辛烷磺酸钠（3.1.2 ）， 用水溶解并定容至1L，摇匀，用磷酸（3.1.4 ）调至pH=2.5 ，经微孔滤膜（3.6 ）过滤，待用。 3.6 微孔滤膜：0.45μm ，水相。 4 仪器和设备 4.1 高效液相色谱仪：配有紫外（UV ）检测器或二极管阵列（DAD ）检测器。 4.2 分析天平：感量分别为0.01mg 、0.0001g 和0.00 1g。 18 4.3 超声波提取器：功率250W ，频率33kHz 。 5 分析步骤 5.1 试样制备 5.1.1 试样提取 5.1.1.1 固体试样 准确称取粉碎并混合均匀的试样0.1g~2g （准确至0.0001g ，含待测组分约5mg~50mg ）， 于50mL 容量瓶中，加入盐酸溶液（3.4 ）约35mL ，超声提取10min，放至室温，用盐酸溶 液（3.4 ）稀释至刻度，摇匀，过滤，弃初滤液，收集续滤液，再经微孔滤膜（3.6 ）过滤， 续滤液进液相色谱仪分析。 5.1.1.2 软胶囊试样 取软胶囊剪开，挤出内容物并混匀，准确称取2g （准确至0.0001g ），准确加入等量硅 藻土（3.1.5 ），研至分散均匀，准确称取其中部分（准确至0.0001g ，含待测组分约5mg~50mg ）， 转移至250mL 具塞三角瓶中，吸取盐酸溶液（3.4 ）50.0mL ，并入三角瓶中，称重（准确至 0.001g ），加塞超声提取10min，放至室温，用盐酸溶液（3.4