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八、保健食品中核苷酸的测定
第一法
1 范围
本方法规定了保健食品中核苷酸的超高效液相色谱（UPLC ）测定方法。
本方法适用于保健食品中核苷酸的测定。
2 原理
将试样溶解、去除蛋白后，经超高效液相色谱（UPLC ）分离，以相对保留时间定性，
峰面积定量。
3 试剂
注：除特殊说明，所用试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T 6682 一级水要求。
3.1 乙腈（CH CN ）：优级纯。
3
3.2 乙酸 （C H O ）：36%～37% （g/g ）。
2 4 2
3.3 磷酸（H PO ）。
3 4
3.4 磷酸氢二钠（Na HPO ）。
2 4
3.5 标准品
核苷酸标准样品的分子式、相对分子量、CAS 登录号见表 1，纯度≥97% ，或经国家认
证并授予标准物质证书的标准物质。
表1：各核苷酸标准品的分子式、相对分子量、CAS 登录号
名称 英文名 CAS 分子式 相对分子量
鸟嘌呤核苷酸 Guanine nucleotide （GMP ） 85-32-5 C H N O P 363.22
10 14 5 8
腺嘌呤核苷酸 Adenine nucleotide （AMP ） 61-19-8 C H O N P 347.22
10 14 7 5
次黄嘌呤核苷酸 Hypoxanthine nucleotide （IMP ） 131-99-7 C H N O P 348.21
10 13 4 8
胞嘧啶核苷酸 Cytosine nucleotide （CMP ） 63-37-6 C H N O P 323.20
9 14 3 8
尿嘧啶核苷酸 Uracil nucleotide （UMP ） 58-97-9 C H N O P 324.18
9 13 2 9
3.6 标准溶液配制
3.6.1 核苷酸标准储备液：称取经100℃干燥4h 处理的核苷酸标准品（3.5 ）各50mg （精确
至0.1mg ），用水溶解，并转移至100mL 容量瓶中，定容至刻度，此溶液浓度为0.5mg/mL 。
3.6.2 核苷酸标准系列工作液：分别准确吸取不同体积的标准储备液（3.6.1 ），用水将其稀
释成核苷酸含量分别为 10.0μg/mL、20.0μg/mL 、40.0μg/mL 、80.0μg/mL 、100μg/mL 的标准
系列工作液。临用时配制。
4 仪器和设备
4.1 超高效液相色谱仪（UPLC ）：配有二极管阵列检测器或紫外检测器。
4.2 分析天平：感量分别为0.1mg 和0.001g 。
5 分析步骤
5.1 试样制备
5.1.1 不含蛋白试样
33
称取试样适量于100mL 棕色容量瓶中，加入约50℃的热水80mL，彻底混匀，超声30
分钟，冷却至室温后用水定容至刻度。过滤，滤液过0.22μm 针孔滤膜，超液相色谱仪测定。
5.1.2 含蛋白试样
称取试样适量于10
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