DB34∕T 3660-2020 鸭肝炎病毒1型和3型双重RT-PCR检测方法(安徽省).pdfVIP

TCS 11.220 B 41 DB34 巳 山 T E l-. 文 徽 省 ， 且 万 标 准 DB 34/T 3660-2020 鸭肝炎病毒 1 型和 3 型双重 RT-PCR 检测方法 Duplex RT-PCR assay for detection of duck hepatitis virus type 1and type 3 2020 - 08 - 03 发布 2020 - 09 - 03 实施 安徽省市场监督管理局 发布 DB34/T 3660--2020 目IJ 1=1 本标准按照四月1. 1-2009 给出的规则起草。 本标准由安徽省农业科学院畜牧兽医研究所提出。 本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位:安徽省农业科学院畜牧兽医研究所、安徽省动物疫病预防与控制中心、太湖县小 ;也镇农业农村综合服务中心、合肥野生动物园、铜陵市动物疫病预防与控制中心、铜陵市义安区畜牧兽 医局。 本标准主要起草人:潘孝成、占松鹤、沈学怀、何学丰、郭长进、范萍萍、尹磊、赵瑞宏、戴银、 何为俊、吴娟、胡晓苗、{吴宏艳、周学利、张丹俊、周迎春、王军。 DB34/T 3660--2020 鸭肝炎病毒 1 型和 3 型双重 RT-PCR 检测方法 1 范围 本标准规定了鸭肝炎病毒l 型 CDHV-1) 和鸭肝炎病毒3型 CDHV-3) 双重RT-PCR检测方法的技术要求。 本标准适用于鸭病变肝组织、接种疑似病料的鸭胚尿囊液或细胞培养物中DHV-1 型和DHV-3型核酸的 检测。 2 缩略语 下列缩回各i吾适用于本文件。 DHV: 鸭肝炎病毒 (duck hepatitis virus) RT-PCR: 反转录聚合酶链式反应 Creverse transcription-po1yrnerase chain reaction) RNA: 核糖核酸 Cribonuc1eic acid) DNA: 脱氧核糖核酸 Cdeoxyribonuc1eic acid) DEPC: 焦炭酸二乙醋 Cdiethy1pyrocarbonate) Taq酶 Taq DNA聚合酶 (Taq DNA po1yrnerase) dNTP: 脱氧核糖核昔三磷酸 Cdeoxy-ribonuc1eoside triphosphate) M-MLV: 莫洛尼氏鼠臼血病病毒 (rno1oney rnurine 1eukernia virus) PBS: 磷酸缓冲液 (phosphate buffer solution) TAE: Tris一乙酸电泳缓冲液 (tris acetate-EDTA buffer) EB: 1:臭化乙链 (ethidiurn brornide) 3 主要仪器 3. 1 PCR 扩增仪。 3. 2 台式低温高速离心机(最大离心力 1 2000 g 以上)。 3.3 电泳仪。 3.4 凝胶成像系统。 0 0 3. 5 冰箱 (-20 C: -80 C) 。