基因工程及其应用 课件 .ppt

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家蚕能够吐出蚕丝为人类利用 豆科植物的根瘤能够固定空气中的氮 基因工程的概念: 又称为基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的性状。 * 第2节 基因工程及其应用 青霉菌能产生对人类有用的抗生素 ——青霉素 基因决定性状 基因决定性状 基因决定性状 设想一 能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮? 能否让细菌“吐出”蚕丝? 设想二 能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物? 设想三 定向基因改造设想 经过多年的努力,科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。 你知道为什么能把人的基因“嫁接”到细菌上吗?你能推测出,这种基因的“嫁接”是怎么实现的吗?你能举出一些类似的、与你的生活关系很密切的例子吗? “嫁接”了人胰岛素基因的工程菌 基因工程的原理:基因重组 操作水平:DNA分子水平 操作环境:生物体外 结 果:定向地改造生物的性状,获得人类所需要的品种。 二、 基因工程的工具 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子。 1、基因的“剪刀”—限制性核酸内切酶(限制酶) 切割目的基因、切割运载体 作用: 高度的专一性、 特点: 多样性 限制酶 例如:大肠杆菌的一种叫做EcoRI的限制酶,能专一识别GAATTC的序列,并在G和A之间将这段序列切开。 什么叫黏性末端? 被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,它们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。 2.基因的“针线”——DNA连接酶 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,是把梯子两边扶手的断口连接起来,这样一个重组的DNA分子才能形成。 作为运载体必须具备哪些条件? 2、能够在受体细胞中复制并稳定地保存。 3、具多个限制酶切点,以便与外源基因连接。 4、具有某些标记基因,便于进行筛选。 如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。 1、能进入受体细胞中,能“友好”地“寄居”在受体细胞中 大肠杆菌的质粒: 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒,其中常含有抗药基因,如四环素的标记基因。质粒的存在与否对受体细胞生存没有决定性作用,但复制只能在受体细胞内进行。 三、基因工程基本步骤 1、提取目的基因 基因工程的第一步,是取得人们所需要的特定基因,也就是目的基因如抗虫基因,抗病基因、种子的贮存蛋白基因,以及人的胰岛素基因、干扰素基因等都是目的基因。 要获得目的基因,主要有两条途径: 一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因, 另一条是人工合成基因。 2、目的基因与运载体结合   用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口,将目的基因插入切口处,让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后,在连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。 细菌 供体细胞 取出质粒 取出DNA 用限制酶切断DNA 用连接酶连接目的基因 用同一种限制酶切割目的基因和运载体 形成相同的黏性末端 用DNA连接酶连接目的基因和运载体 形成重组DNA分子 利用病毒感染细胞的能力 对细菌进行处理,增大其细胞壁的通透性 利用显微注射技术等 目的基因和运载体的结合、目的基因导入受体 细胞等环节的成功率并不高。 3、 将目的基因(带有目的基因的重组DNA分子)导入受体细胞 将重组DNA导入受体细胞 扩增 4、目的基因的表达和检测    通过检测受体细胞是否具有标记基因所控制的性状 例如:运载目的基因的细菌质粒上有抗四环素 基因作为标记基因,便可以将受体细菌 培养在含有四环素的培养基上, 能存活的即是成功导入了重组质粒的。 大量的受体细胞接受不多的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少,必须将它从中检测出来。 检测受体细胞(生物)是否产生目的基因的表达 产物,或者是否具备由目的基因控制的性状 例如,要检测毒蛋白基因是否在棉花植株中表达, 观察能否从棉花细胞中分离出毒蛋白 观察棉花植株是否有抗虫能力 1、基因工程与作物育种 利用转基因技术培育高产、稳产、优质、 抗逆性好、抗虫能力强的作物新品种 减少化肥、农药的用量,降低成本, 增强竞争力,保护环境 1993年,中国农业科学院的科学家成功地培育出了抗棉铃虫的转基因抗虫棉,抗虫的基因来自苏云金杆菌。苏云金杆菌形成的伴胞晶体是一种毒性很强的蛋白质晶体,能使棉铃虫等鳞翅目害虫瘫痪致死。科学家将编码这个蛋白质的基因导入作物,使作物自身具有抵御虫害的能力。 抗虫棉 抗

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