高二生物选修三教案系列：DNA的粗提取与鉴定-副本.docx

新人教版高二生物选修三教案系列： DNA的粗提取与鉴定 课型：新授课 课时： 1 课时 备课人： 一、教学目标： 本课题通过尝试对植物或动物组织中的 DNA进行粗提取， 了解 DNA的物理化学性质， 理解 DNA粗提取 以及 DNA鉴定的原理。 二、教学重点 、难点： DNA 的粗提取和鉴定方法。 学习内容 基 一 . 实验原理——提取 DNA的方法： 础 1.提取生物大分子的基本思路 : 知 （1）选用一定的 方法分离 。 识 （ 2 ） DNA 的粗提取：就是要利用 DNA 与 、 和 等在 梳 ________________ 方面的差异，提取 DNA ，去除其他成分。 理 2.DNA 的物理和化学性质： （1） DNA 的溶解性： ①DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 溶液中溶解度不同，利用 这一特点，选择适当的盐浓度就能使 ，而使 ，或 者 ，以达到分离目的。 ②DNA在 0.14mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度 ______，DNA会 _____，其他杂质溶解。 ③DNA 不溶于 溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这 一原理，可以将 DNA 与蛋白质进一步的分离。 （2） DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性： ①蛋白酶能水解 ，但是对 没有影响。 ②大多数蛋白质不能忍受 60—80oC 的高温，而 DNA 在 以上才会变性。 ③洗涤剂能够瓦解 ，但对 _________ 没有影响。 (3)DNA 的鉴定 : DNA 在 条件下， DNA 遇 会被染成 色，因此 _________可以作为鉴定 DNA 的试剂。  师生 活动 学生通 过阅读 课 本 P2-11 页，独 立完成 以下内 容 并 在书上 作出标 记，加 以记忆 教 师 对 学 生 提 出 的 疑 难 知 识 进 行 梳 理； 学 生 进 行 理 解 并 加 以 记忆。  时间 安排 10 二. 实验设计： 1. 实验材料的选取： 凡是含有 的生物材料都可以考虑，但是使用 的生物组织，成功的可能性更大。 2．破碎细胞，获取含 DNA 的滤液： （ 1 ）动物细胞的破碎（以鸡血细胞为例） ：在鸡血细胞液中加入一定量 的 ，同时用 搅拌，过滤后收集滤液即可。 2 植物细胞的破碎（以洋葱细胞为例）：在切碎的洋葱中加入一定的 和，进行充分的 ___________，过滤后收集研磨液。 3.去除滤液中的杂质： 方法一： ①在滤液中加入 _____，使物质的量浓度为 ______mol/L ，_______除去 ____杂质； ②再调节 ______溶液物质的量浓度为 ___mol/L ，析出 _____，____ 除去 ____杂质； ③再用 ___________溶解 DNA 。 方法二：直接在滤液中加入嫩肉粉，反应 10~15min ，嫩肉粉中的 ________能够 分解蛋白质。 方法三：将滤液放在 ________的恒温水浴箱中保温 10~15min ，注意严格控制温 度范围，使蛋白质变性，而 DNA 分子还未变性，可将 DNA 与蛋白质分离。 4.DNA 的析出与鉴定 : （1）DNA 的析出：将处理后的溶液过滤， 加入与滤液体积 、 ， 静置 ，溶液中会出现 ，这就是粗提取的 DNA 。用玻璃 棒 搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分。 （2） DNA 的鉴定： ①取两支 20ml 的试管，各加入物质的量浓度为 的 NaCl 溶液 5ml ，将丝状 物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。 ② 向两支试管中各加 入 4ml 的 。混合均匀后， 将试管置于 中加热 5min ，待试管冷 却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有 DNA 的溶液是否变 。 5.操作提示： ①以血液为实验材料时， 每 100ml 血液中需要加入 3g ，防止 。 ② 加入洗涤剂后，动作要 、 ，否则容易产生大量的泡沫，不 利于后续步骤地操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要 ，以 免 ，导致 DNA 分子不能形成絮状沉淀。 ③二苯胺试剂要 ，否则会影响鉴定的效果。 ④盛放鸡血细胞液的容器，最好是塑料容器。鸡血细胞破碎以后释放出的 DNA， 容易被玻璃容器吸附，由于细胞内 DNA的含量本来就比较少，再被玻璃容器吸 附去一部分，提取到的 DNA就会更少。因此，实验过程中最好使用塑料的烧杯 和试管，这样可以减少提取过程的 DNA的损失。 三．结果的分析与评价 思 1.DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度曲线如下图即 （图 5— 1），请根据曲线图， 思考： 学 生 按 20 考 ①在什么浓度下， DNA 的溶解度最小？ 溶解度 小 组 分 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度是如何变化的