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造血调控2011;第一节 造血器官;一、胚胎期造血器官 ;
胚胎期造血的三个时期不能截然分开,此消彼长,互为交错。;二、出生后造血; 一、造血细胞的生长发育
是一个连续不断的复杂过程,造血器官内的各种造血细胞在造血微环境中通过细胞与细胞之间相互作用,在各种细胞因子的诱导下,按一定的规律发育成为各种成熟的血细胞,然后释放入血循环中。
; (一)基本过程 ;造血细胞的增殖(proliferation); 造血细胞的分化(differentiation)
细胞发育过程中失去某些潜能而获得新功能的过程,即由多潜能转变为单潜能的过程。
分裂后的细胞在形态和功能上产生新的特征,分化过程是不可逆的。
; 造血细胞的成熟(maturation)
造血干细胞定向分化,从原始经幼稚到成熟细胞的发育过程。血细胞越成熟其形态越易辨认,功能也日趋完善。成熟的血细胞在骨髓内通过“髓血屏障”释放入血循环中。;(二)造血细胞生长发育阶段;;二、造血干/祖细胞特性;(一)造血干细胞; 1.造血干细胞的基本特征
(1)自我更新
即细胞通过有丝分裂产生的两个子代细胞与亲代细胞具有相同的特征。造血干细胞的自我更新是维持其数量平衡的基础,亦称自我维持。高度的自我更新能力是造血干细胞最基本的生物学特征之一。;(2) 造血干细胞静止状态; (3) 造血干细胞全能性(多向分化)
;(4) 造血干细胞不均一性; 2.造血干细胞检测
单个细胞在生物体内有能力长期重建造血是判断该细胞为造血干细胞的“金标准”。
造血干细胞的数量极少,形态上不能区别,干细胞抗原性弱,仅有很少表面抗原。; (1)脾集落测试法
1961年Till等首先采用体内试验小鼠脾集落形成间接证明了造血干细胞的存在:
将受体小鼠以致死剂量射线照射后,破坏全部造血细胞,再输以供体骨髓或血液,小鼠能存活,并在受体小鼠脾中形成红系、粒系、巨核系细胞结节,这些都是由单个细胞增殖分化而来,即脾集落形成单位(CFU-S)。;(2)单克隆抗体法 ;(二)造血祖细胞;造血祖细胞根据其分化能力,可分为多向祖细胞和单向祖细胞。多向祖细胞可进一步分化 为单向祖细胞。
通过体外造血细胞半固体培养证实了造血祖细胞的存在。;(三)造血干/祖细胞的临床应用; 第三节 造血调控;一、集落刺激因子类
( colony-stimulating factors, CSFs )
;4.巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)
促进单核系祖细胞的增殖和分化,激活巨噬细胞的吞噬和分泌功能。
; 二、白细胞介素(interleukin, IL);三、其它细胞因子;1.原癌基因
如:c-myc基因、ras相关基因、c-abl基因、bcl-2 基因、c-kit基因等。; 2. 抑癌基因; 对造血中基本的基因调控机制
仍存在若干悬念有待研究:; 第四节 造血干/祖细胞体外培养技术;一、造血干/祖细胞体外培养的基本条件; 二、造血干/祖细胞体外培养;(5)待支持物降至40℃左右,加入培养体系并混匀。
(6)将混匀后的培养体系加入培养皿或培养板孔内,
一般平行做3份。
(7)于5% CO2、饱和湿度及37℃温箱内孵育。BFU-E
需14天,CFU-E需7天。
(8)观察结果。
;(二)红系祖细胞诱导分化的液体培养:; 三、造血祖细胞培养的主要应用:;红细胞爆式集落形成单位
(BFU-E);;此课件下载可自行编辑修改,仅供参考!感谢您的支持,我们努力做得更好!谢谢
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