【揭秘化妆品安全性评价技术（八）】化妆品安全性评价.docVIP

【揭秘化妆品安全性评价技术（八）】化妆品安全性评价 　　 　　 　　化妆品中存在许多光感性物质，如含有共轭结构的防晒剂、指甲油和唇膏的某些着色剂、用于化妆品中的杀菌剂三氧N-碳酸苯胺、三氯生，含香豆素类的某些植物提取物（如甘菊环烃、六-甲基香豆素、贯叶金丝桃提取物、茉莉、肉桂、葵子麝香），以及药物和某些功能性化妆品（特殊用途化妆品）原料如氯丙嗪、盐酸氯丙嗪氟喹诺酮、噻嗪、酚噻嗪、磺胺、喹啉、苯酮等。这些物质通过接触、口服、注射等途径进入体内，与一定照射剂量的光线或紫外线接触后诱发的不良反应均可称之为光毒性效应，具体可包括皮肤毒性反应、迟发性免疫反应、光遗传毒性和光致癌性等。 　　各国化妆品法规均规定，能吸收紫外线的化妆品成分和化妆品成分的混合物（用于紫外线过滤剂的化学物，例如用于确保化妆品的光稳定性或用于防晒产品中）应进行急性光毒性和潜在光遗传毒性测试。对于潜在光致敏性和光遗传毒性的测试不作特别要求，但这类试验也常进行。 　　一、光毒性效应及临床表现 　　紫外线是由原子的最外层电子从高能级向低能级跃迁时以光形式释放的能量，根据波长范围分为UVA(315nm～400nm)、UVB(280nm～315nm)和UVC?(100nm～280nm)，不同波长的紫外线产生不同的生物学效应。紫外线的主要作用是激发或催化物质产生化学作用，除用于杀菌外，过量的紫外线照射诱发皮肤光毒性效应。临床表现主要有以下几种： 　　1、光毒性皮炎：指化妆品中某些物质能增强皮肤对光的敏感性，日光照射激活此类物质对皮肤产生刺激作用而导致皮肤损伤，与免疫无关。指甲油和唇膏中常用的着色剂，如荧光素和曙红为光敏剂。煤焦油和沥青等物质中含有强光敏性物质蒽、甲基蒽及荧蒽等，当UV照射到吸收了这些物质的皮肤时，可与皮肤发生光毒性炎症反应。长期职业接触煤焦油和沥青可形成职业性黑变病。 　　2、光变应性接触性皮炎：是接触光变应原物质后，在暴露于光线的部位出现的皮肤炎症反应，而在不接触光的部位则不出现这种反应。该变应性反应属于T细胞介导的湿疹样反应，表现以湿疹为特征，在暴露部位出现小疱疹和发展为大疱疹，并伴有脱屑、结痂，慢性阶段可出现苔癣样皮肤增厚。例如皮肤接触含有对羟基甲酸及其酯类物质等变应原的防晒化妆品，只要一次接触日光即可发生此类皮炎并持续1周左右。葵子麝香是重要的光变应原，皮肤使用含该香料的化妆品可引发光变应性皮炎，甚至可发展为持久性光敏反应。接触含煤焦油染料的化妆品可引起光变应性皮炎，后期可出现色素沉着，也称之为“色素性化妆品皮炎”。常见的光致敏原还有磺胺类药物、吩噻嗪、香豆素、苯胺、香皂和除臭剂中的杀菌剂三氧N-碳酸苯胺、防晒剂中的对氨基苯甲酸衍生物。 　　3、职业性色素加深：过度接触紫外线、日光、红外线、煤焦油及其衍生物、橡胶改良剂和防老化剂，无机砷、碳素及某些染料，或从事避孕药及氯丙嗪生产等，均有可能引起皮肤色素增多。波长越短，透入皮肤的深度越小，照射后黑色素沉着较弱，波长越长，透入皮肤的深度越大，照射后黑色素沉着较强。紫外线作用于黑色素细胞，引起黑色素在细胞内从底部向表面转移重新分布，造成皮肤色素增加。在UV下照射5min内，皮肤可暂时性变黑，称为晒斑反应，主要由长波紫外线UVA引起的。 　　4、皮肤癌：紫外线是皮肤的主要致癌因素，鳞状细胞癌和表皮基底细胞癌通常与慢性或过量的UV暴露相关。部分化学物质也能诱发皮肤癌，如多环芳烃和无机砷等还参与UV致癌作用的调控。 　　二、光毒性的体内实验 　　光敏物质的共同特点是能吸收300~750?nm波长范围的光线，吸收 光能量后被激活而成为活跃状态。按照光化学第一定律，只有吸收足够的光量子才能发生光化学反应。因此测定被测物质的UV/可见光吸收光谱是任何体外或体内生物系统测试光敏特性的前提。具体测定方法可参考OECD试验指南101和国家GB/T9721-2006《化学试剂分子吸收分光光度法（紫外可见光部分）》。如果摩尔消光/吸收系数小于10L/mol-1 cm-1，则该化学物质光吸收低，不可能具有光反应性。不必进行任何其它测定光化学效应的生物学试验，包括急性光毒性体内和体外试验。 　　1、人体光斑贴试验 　　人体光斑贴试验是通过在人体皮肤表面直接敷贴受试物，并同时接受一定剂量适当波长紫外线照射的方法，检测诱发光毒性与光变应性皮炎的光敏剂以及检测机体对某些光敏剂反应的一种皮肤试验。方法和一般斑贴试验一样，首先将被检物贴敷在患者背部或前臂屈侧，同时照射UVB和UVA，测定其最小红斑量（MED）。24～48h后以3/4MED的光线照射贴敷物的一半，再过48h观察结果，如果仅在贴敷物+照射部位发红，水肿或发生小丘疹（有时发生小水疱）时为阳性反应，被检物质即是光感物质。 　　2、光毒性动物实验 　　将一定量受试物