专题课题微生物的实验室培养.pptxVIP

课题1 微生物的实验室培养;㈠.微生物的类群;一、基础知识：;固体培养基;2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方。（参考课本P83 附录3）;;①无机氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。;注意：;二、无菌技术;消毒：指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部部分微生物（不包括芽孢和孢子）。;芽孢;①煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min。 ②巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或 80℃下煮15min。 ③化学药剂消毒法：用75%酒精等进行皮肤消毒；氯气消毒水源。 ④紫外线消毒;①灼烧灭菌 ②干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h。 ③高压蒸气灭菌：100kPa、121 ℃下维持15-30min.;1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？;二.实验操作(以培养大肠杆菌为例);倒平板;答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。;3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？;耐高温需保持干燥的 物品，160～170℃ 1～2小时;1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方;纯化大肠杆菌;二.大肠杆菌的纯化培养：;平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作,将聚集的菌钟逐步稀释分散到培养基的表面. 在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落.;几种菌落及其形态;答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。;2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？;答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种??数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。;2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？;6支试管，分别加入9ml无菌水;⑵稀释涂布平板法：;稀释涂布平板法:是指将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 在稀释度足够的菌液里，聚集在一起的微生物将分散成单个的细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。;答：应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。;3.菌种的保存;三.结果分析与评价 ;本课题知识小结:;划分标准;液体培养基：;选择培养基;　　伊红—美蓝培养基是鉴别培养基，可以用来检测自来水中的大肠杆菌是否超标，因为的代谢产物与伊红—美蓝结合，使菌落呈黑色并带有金属光泽，使大肠杆菌的菌落显示出来，并没有促进大肠杆菌的生长和抑制其他微生物的生长。;营养类型;N2;【典例解析】;例2：下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是( ) A.防止杂菌污染 B.消灭杂菌 C.培养基和发酵设备都必须灭菌 D.灭菌必须在接种前;自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是( ) A．碳源 B．氮源 C．无机盐 D．特殊营养物质;涂布器;倒平板;1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方;1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方;1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方;答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。;2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？;　　伊红—美蓝培养基是鉴别培养基，可以用来检测自来水中的大肠杆菌是否超标，因为的代谢产物与伊红—美蓝结合，使菌落呈黑色并带有金属光泽，使大肠杆菌的菌落显示出来，并没有促进大肠杆菌的生长和抑制其他微生物的生长。;　　伊红—美蓝培养基是鉴别培养基，可以用来检测自来水中的大肠杆菌是否超标，因