缓冲溶液的配制和性质实验的报告结论.doc

完美 .格式 .编辑 一一一缓冲溶液的配制和性 质、溶液 pH 值测定 【实验目的】 学习缓 冲溶液及常用等渗磷酸 盐缓 冲溶液的配制方法。 加深对缓 冲溶液性 质的理解。 强化吸量管的使用方法。 学习使用 pHS-2C型酸度 计 。 培养环境保护意识。 【预习作业】 一般性溶液与 缓冲溶液有什么不同？ 缓冲溶液的性 质有哪些？ 如何衡量 缓冲溶液的 缓冲能力大小？ 缓冲溶液的 缓冲能力与什么因素有关？ 实验是如何 设计 以验证缓 冲溶液所具有的性 质及缓冲容量的影响因素的， 设计时有哪些注意事 项？ 该如何 检测缓 冲溶液的 pH 值是否发生改 变？是否均需要用 pH计？ 本实验 属定量 测定还是定性 测定或半定量 测定？ 【实验原理】 普通溶液不具 备抗酸、抗碱、抗稀 释作用。 缓冲溶液通常是由足 够浓度的弱酸及其共 轭碱、弱碱及其共 轭酸或多元酸的酸式 盐及 其次 级盐组 成的，具有抵抗外加的少量 强酸或强碱、或适当稀 释而保持溶液 pH 值基本不 变的 作用。 本实验通过将普通溶液和配制成的 缓冲溶液 对加入酸、碱或适当稀 释前后 pH数值的变 化来探 讨缓冲溶液的性 质。 根据 缓冲溶液中共 轭酸碱对所存在的 质子转移平衡： HB ? B－+H 3O+ 缓冲溶液 pH 值的计算公式 为： pH p a lg [B －] p a lg [ 共轭碱] p a lg 缓冲比 K K K [HB] [ 共轭酸] 式中 pK a为共轭酸解离常数的 负对 数。此式表明：缓冲溶液的 pH值主要取决于弱酸的 pK a 值，其次决定于其 缓冲比。 需注意的是，由上述公式算得的 pH 值是近似的，准确的 计算应该 用活度而不 应该用浓度。要配制准确 pH值的缓冲溶液，可参考有关手册和参考 书上的配方，它 们的pH 值是由精确的 实验 方法确定的。 缓冲容量（β）是衡量缓冲能力大小的尺度。 缓冲容量（β）的大小与缓冲溶液 总浓度、缓冲组分的比 值有关。 [HB] × [B－ ] [B －] β＝ 2.303 × －] ＝2.303 × [HB] ＋[B 1＋缓冲比 缓冲溶液 总浓 度越大 则 β越大；缓冲比越 趋向于 1,则 β越大，当 缓冲比 为 1时，β达极大 值 。 实验 室中最 简单 的测定缓冲容量的方法是利用酸碱指示 剂变 色来 进行判断的。例如：本 专业 .资料 .整理 完美 .格式 .编辑 实验 就使用了甲基 红指示 剂。 表 2-3-1 甲基红指示剂变色范围 pH 值 ＜4.2 4.2～6.3 ＞ 6.3 颜色 红色 橙色 黄色 医学上常用 PBS(等渗磷酸 盐缓 冲盐水 )作为体外 细胞缓冲培养液。 PBS是与人体血 浆渗透压 (280～ 320mOsmol·L-1)等渗，并与人体血液 pH值 (7.35 ～7.45)一致的含有 NaCl 、KCl 、Na2 HPO4、KH 2PO4等物 质的磷酸 盐缓冲液。根据不同用途， PBS有不同的配制方法，如用于 细胞培养的 pbs配方为：8g NaCl ，0.2g KCl ，0.24g KH 2PO4，1.44g Na2 HPO4，加水至 800ml ，用HCl 调 pH 至 7.4，补水至 1L ，消毒灭菌既得。 其在水溶液中的 质子转移平衡如下： 24－＋ H2 242－＋H3 + 2 H PO O?HPO O K a 由上式可知 该缓 冲液 pH的计算公式 为 pH pKa [共轭碱 ] pKa2 [HPO 42- ] lg lg [共轭酸 ] [KH 2PO4- ] 该公式计算出来的数 值由于未考 虑溶液的活度，所以所得的数 值仍为近似 值。 【仪器与试剂】 仪器：吸量管(5mL×5，10mL×5) ，比色管 (20mL×4)，量筒(10mL) ，烧杯 (50mL×6)，试管 (10mL ×6，20mL× 6)，滴管，玻棒，洗瓶，pHS-2C 型酸度 计等 -1 -1 -1 -1 - 试剂 ：1.0mol ·L HAc ，0.1mol ·LHAc ，1.0mol ·LNaAc ，0.10mol ·LNaAc ，0.15mol ·L 1 2 -1 2 -1 -1 -1 4，0.10mol ·L HPO 4，0.15mol ·L ·LKCl ，1.0mol ·LNaOH ， KH PO Na NaCl ，0.15mol 1.0mol -1 -1 ·LHCl ，0.15mol ·LHCl ，蒸馏水，甲基红指示 剂，广泛pH 试纸，自带试样 两份 【实验步骤】（方法1） 一、缓冲溶液的配制 按照表 2-3-2中用量，用吸量管配制甲、乙、丙及 细胞培养用 PBS缓冲溶液于已 标号的四 支10mL ，20mL 比色管中，备用。二、缓冲溶液的性