分子克隆实验最全面解决方案设计..pdf

分子克隆实验原理 分子克隆实验原理 • 一、菌种保存和活化 • 二、质粒提取和保存 • 三、感受态细胞的制备 • 四、载体的制备 • 五、基因的制备 • 六、连接 • 七、转化 • 八、重组克隆的筛选 菌种保存和活化 一.甘油菌保存： • 1、100 ul菌液＋100 ul灭菌甘油 【混匀】 • 2、多制备几管，做上标记 【菌名，质粒，时间】 • 3、－20 ℃可保存半年； 【－80 ℃可长期保存】 二、甘油菌活化： • 1、取一管甘油菌，混匀； • 2、用接种针接种并在