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分子克隆实验原理
分子克隆实验原理
• 一、菌种保存和活化
• 二、质粒提取和保存
• 三、感受态细胞的制备
• 四、载体的制备
• 五、基因的制备
• 六、连接
• 七、转化
• 八、重组克隆的筛选
菌种保存和活化
一.甘油菌保存:
• 1、100 ul菌液+100 ul灭菌甘油 【混匀】
• 2、多制备几管,做上标记 【菌名,质粒,时间】
• 3、-20 ℃可保存半年; 【-80 ℃可长期保存】
二、甘油菌活化:
• 1、取一管甘油菌,混匀;
• 2、用接种针接种并在
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