重点实验课一检测生物组织中的糖类油脂和蛋白质.pptVIP

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2020-12-09 发布于天津
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重点实验课一检测生物组织中的糖类油脂和蛋白质.ppt

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首页上一页下一页末页结束生物重点实验课 ( 一 ) 检测生物组织中的糖类、油脂和蛋白质重点实验课 ( 一 ) 检测生物组织中的糖类、油脂和蛋白质［配有演示视频见课件光盘］超链接一、实验原理橙黄色检测物质鉴定试剂颜色反应还原糖油脂苏丹Ⅲ染液蛋白质紫色红黄色双缩脲试剂本尼迪特试剂 ―――――― → 80 ～ 100 ℃ 水浴首页上一页下一页末页结束生物重点实验课 ( 一 ) 检测生物组织中的糖类、油脂和蛋白质制备组织样液颜色反应：结论：选材：二、操作流程 1 ．还原糖的检测含糖量白色或近于白色较高、的植物组织 ? ? ? ? ? ? ? 制浆过滤 ? 用一层纱布 ?? 取液组织样液中有可溶性还原糖首页上一页下一页末页结束生物重点实验课 ( 一 ) 检测生物组织中的糖类、油脂和蛋白质制片 2 ．脂肪的检测方法一：花生种子匀浆＋ 3 滴苏丹Ⅲ染液 ―→ 橘黄色。方法二：取材：花生种子 ? 浸泡 ? ，将子叶切成薄片观察：先在低倍镜下寻找到已着色的颗粒，再用高倍镜观察，花生子叶切片中有橙黄色颗粒结论：花生种子的子叶中有油脂存在 ? ? ? ? ? ? ? ①取最理想的薄片 ②滴 2 ～ 3 滴苏丹Ⅲ染液 ? 染色 3 min ?? ③去浮色 ? 1 ～ 2 滴体积分数为 50% 的酒精溶液 ?? ④制成临时装片 ? 1 滴蒸馏水，加盖玻片 ? 首页上一页下一页末页结束生物重点实验课 ( 一 ) 检测生物组织中的糖类、油脂和蛋白质选材与制备结论：组织样液中存在蛋白质 3 ．蛋白质的检测颜色反应 ? ? ? ? ? 鲜肝提取液或蛋清稀释液黄豆浆滤液首页上一页下一页末页结束生物重点实验课 ( 一 ) 检测生物组织中的糖类、油脂和蛋白质 1 ．本尼迪特试剂与双缩脲试剂比较样液变紫色都含有 NaOH 、 CuSO 4 两种成分，且所用 NaOH 溶液浓度都是 0.1 g/mL 相同点样液浅蓝色→棕色→红黄色反应现象不需加热 80 ～ 100 ℃水浴加热反应条件先加入 A 液 2 mL 摇匀，再加 5 滴 B 液摇匀甲、乙两液等量混匀后使用添加顺序具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与 Cu 2 ＋反应生成络合物含醛基的可溶性还原糖将 Cu(OH) 2 还原为 Cu 2 O 沉淀反应原理 0.01 g/mL CuSO 4 溶液 0.1 g/mLNaOH 溶液 0.05 g/mL CuSO 4 溶液 0.1 g/mL NaOH 溶液 B 液 A 液乙液甲液成分双缩脲试剂本尼迪特试剂比较项目首页上一页下一页末页结束生物重点实验课 ( 一 ) 检测生物组织中的糖类、油脂和蛋白质 2. 注意事项 (1) 三个实验中都不宜选取有颜色的材料，否则会干扰实验结果的颜色变化。 (2) 在还原糖、蛋白质的鉴定实验中，在加相应试剂鉴定之前，要留出一部分组织样液作为对照，以便与鉴定后的样液颜色作对比，增强实验的说服力。 (3) 在蛋白质的鉴定实验中，如果用蛋清稀释液作为实验材料，一定要稀释到一定程度，否则，与双缩脲试剂发生反应后会粘在试管的内壁上，使反应不彻底，试管也不易洗刷干净。首页上一页下一页末页结束生物重点实验课 ( 一 ) 检测生物组织中的糖类、油脂和蛋白质 (4) 在油脂的鉴定中，实验用的花生种子需提前浸泡 3 ～ 4 h ，浸泡时间太短，不易切片；浸泡时间太长，则组织太软，切下的薄片不易成形。洗去浮色时不能用清水，因为染液易溶于有机溶剂、不溶于水。 3 ．易错易混辨析 (1) 易忽略本尼迪特试剂本身的颜色：非还原糖 ( 如蔗糖 ) ＋本尼迪特试剂水浴加热后的现象不是无色而是浅蓝色 [Cu(OH) 2 的颜色 ] 。首页上一页下一页末页结束生物重点实验课 ( 一 ) 检测生物组织中的糖类、油脂和蛋白质 (2) 易混淆双缩脲试剂和本尼迪特试剂的使用：本尼迪特试剂 —— 混合后加入，且现配现用；双缩脲试剂 —— 分别加入 ( 先加 A 液，后加 B 液，且 B 液不能过量 )

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